基于GFP/SCL-tTA/Bcr-abl转基因小鼠建立CML嵌合小鼠模型

发布时间：2022-02-15 06:56

　　目的建立慢性粒细胞白血病（CML）的转基因嵌合小鼠模型,为靶向白血病干细胞（LSCs）治疗CML的研究提供良好的动物模型。方法将Bcr-abl转基因小鼠与SCL-t TA转基因小鼠进行杂交,子代小鼠再与GFP转基因小鼠杂交,PCR鉴定Bcr-abl、t TA和GFP基因三阳性的小鼠（GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠）。通过诱导GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠Bcr-abl基因表达4周后,取其骨髓白细胞移植至经致死剂量（900 c Gy）辐照的FVB/N野生型小鼠。移植3周后,采用Western blotting检测Bcr-abl蛋白表达,流式细胞术检测小鼠外周血GFP+中性粒细胞的比例以及脾脏和骨髓GFP+LSCs的比例。结果 PCR结果显示,GFP/SCL-t TA/Bcr-abl小鼠骨髓细胞成功植入FVB/N受体小鼠;Western blotting检测结果显示,移植小鼠的骨髓细胞中表达Bcr-abl蛋白;流式细胞术结果显示,移植小鼠的外周血GFP+中性粒细胞比例以及脾脏和骨髓GFP+LSCs的比例明显升高。结论成功建立了GFP/SCL-t TA/Bcr-a... 

【文章来源】：广东药学院学报. 2016,32(04)

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 主要仪器
        1.1.3 主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 子代小鼠的正常繁殖培养
        1.2.2 子代小鼠的杂交繁殖培养
        1.2.3 PCR检测小鼠GFP、SCL-t TA和Bcr-abl基因
        1.2.4 小鼠骨髓移植
        1.2.5 Western blotting检测Bcr-abl融合蛋白
        1.2.6 嵌合小鼠腿骨及脾脏组织形态学检查
        1.2.7流式细胞仪检测嵌合小鼠GFP+中性粒细胞和GFP+LSCs比例
        1.2.8 统计分析
2 结果
    2.1 PCR鉴定GFP/SCL-t TA/Bcr-abl嵌合小鼠
    2.2 Western blotting检测嵌合小鼠Bcr-abl蛋白的表达
    2.3 流式细胞术检测嵌合小鼠GFP+中性粒细胞和GFP+LSCSs比例
    2.4 嵌合小鼠腿骨及脾脏组织形态结构分析
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]KCL22/NOD-SCID小鼠慢性粒细胞白血病移植瘤模型的建立及其鉴定[J]. 文良雪,刘鑫,李会,黄宁姝,黄峥兰,冯文莉.  中国实验动物学报. 2015(02)
[2]类人慢性粒细胞性白血病小鼠模型的建立[J]. 潘勤,金红,李婧,姜支农,姚云斌,胡金飞,李达,金梅,潘宏铭.  中国病理生理杂志. 2013(08)
[3]小剂量K562细胞NOD/SCID小鼠动物模型的建立[J]. 黎阳,张绪超,黄绍良,魏菁,黄文革,周敦华,吴燕峰.  中山大学学报(医学科学版). 2005(05)

硕士论文
[1]采用逆转录病毒技术建立人慢性粒细胞性白血病小鼠模型[D]. 李婧.浙江大学 2011
[2]bcr/abl逆转录病毒介导的小鼠慢性粒细胞白血病样模型的建立[D]. 张文萍.重庆医科大学 2008



本文编号：3626143