TGF-β1/Smad信号通路参与幽门螺杆菌Tipα诱导的胃癌细胞EMT形成

发布时间：2022-04-23 10:02

　　研究背景:胃癌（gastric cancer）是消化道常见恶性肿瘤,是发生率世界排名第五位的癌症,其死亡率高达75%,因此探索胃癌的发生、发展机制有非常重要的意义。胃癌的发生发展与幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,H.pylori）感染密切相关,其致病机制也是现在的研究热点。TNF-α诱导蛋白（TNF-α-inducing protein,Tipα）是H.pylori特异性的分泌蛋白,被认为是胃癌发展相关的新的致癌因子。新近研究表明,Tipα能够通过诱导胃黏膜上皮细胞炎症反应、上皮-间质转化（epithelial-to-mesenchymal transition,EMT）等参与H.pylori致病过程,但其诱导EMT形成的机制仍不清楚,它所涉及的细胞通路也有待进一步研究。因此研究Tipα对胃癌细胞EMT形成的影响及其相关作用机制,可能为胃癌的临床诊断及靶向治疗提供新的靶点。研究目的:通过H.pylori Tipα处理胃癌细胞系SGC7901细胞,研究Tipα对胃癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等生物学功能影响,探究TGF-β1/Smad信号通路在其中的作用。研究方法:（... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
常用英文缩写
第1章 绪论
第2章 实验材料
    2.1 主要实验仪器设备
    2.2 重组菌、细胞株
    2.3 主要实验试剂
    2.4 引物设计
第3章 实验方法
    3.1 Tipα重组蛋白的诱导表达
    3.2 Tipα重组蛋白的纯化及鉴定
    3.3 纯化蛋白去内毒素
    3.4 胃癌细胞系GC7901细胞复苏、换液、传代及冻存
    3.5 Tipα刺激处理SGC7901细胞
    3.6 实验分组与处理
    3.7 CCK法检测细胞增殖
    3.8 流式细胞术检测细胞凋亡
    3.9 ELISA法检测细胞培养液上清液中TGF-β1水平
    3.10 qRT-PCR技术检测E-cadherin、α-SMA、MMP9、TGF-β1的mRNA表达
    3.11 Western-blot检测E-cadherin、α-SMA、MMP9、TGF-β1、Smad3、p-Smad3蛋白的表达
    3.12 划痕愈合试验检测细胞迁移能力
    3.13 统计学分析
第4章 实验结果
    4.1 Tipα重组蛋白的表达、纯化及鉴定
    4.2 Tipα刺激对SGC7901细胞形态学、增殖和凋亡的影响
    4.3 TGF-β1/Smad信号通路参与Tipα诱导SGC7901细胞EMT的形成
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
综述
    参考文献
课题资助
作者攻读学位期间的科研成果
致谢



本文编号：3646960