KIFC1在精子顶体形成过程中的时空表达特征及其功能研究

发布时间：2022-07-01 10:05

　　目的:探讨C末端驱动蛋白1（KIFC1）在精子顶体形成过程中的时空表达特征及其功能。方法:利用流式分选及免疫荧光技术,分析KIFC1在精子顶体形成过程中的表达和定位。运用体外GC2-spd细胞系筛选出具有高干扰效率的KIFC1的小干扰RNA（RNAi1）,将混有0.5%台盼蓝的KIFC1 RNAi1,显微注射至3周龄Balb/c小鼠的睾丸生精小管内,同一只对侧睾丸注射阴性Con-RNAi;在注射后3周后,取附睾尾部精子进行形态学分析。结果:精子变形早期,KIFC1蛋白主要表达于精子细胞的细胞质中;变形中期,KIFC1蛋白表达于顶体泡及顶体;变形晚期,KIFC1蛋白主要表达于残余体内;成熟期,KIFC1蛋白在精子表达消失。RNAi1组的精子头部畸形率明显高于对照[（32.12±0.25）%vs（7.06±1.25）%,P<0.01]。结论:KIFC1在精子顶体形成过程中可能发挥重要作用,主要影响精子顶体的形成。 

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 人睾丸组织样本
        1.1.2 细胞系及实验动物
        1.1.3 试剂与仪器
    1.2 方法
        1.2.1 流式细胞仪分选人精原细胞、精母细胞及单倍体精子细胞
        1.2.2 免疫荧光染色
        1.2.3 脂质体介导包被的RNAi-KIFC 1 瞬时转染 GC-2 spd 细胞
        1.2.4 Balb/c小鼠睾丸网显微注射及小鼠精子畸形率的检测
        1.2.5 Balb/c小鼠附睾精子透射电镜制样与观察
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 流式细胞仪分选人精原细胞、精母细胞及单倍体精子细胞
    2.2 KIFC1在人睾丸中的表达和定位
    2.3 KIFC1在人精子顶体形成过程中的时空表达
    2.4 Balb/c小鼠睾丸生精小管微注射Kifc1 RNAi1
    2.5 KIFC1在小鼠精子变形中的功能
    2.6 小鼠附睾精子透射电镜结果
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]泛素-蛋白酶体系统与精子DNA损伤修复的研究进展[J]. 张国巍,蔡鸿财,商学军.  中华男科学杂志. 2016(09)
[2]复方氨基酸胶囊联合维生素E治疗特发性弱精子症的临床研究[J]. 周青松,曾凡春,张祯雪,周波,孙中义.  中华男科学杂志. 2016(04)
[3]Y染色体多态性与临床遗传效应的关系[J]. 李中文.  山西医科大学学报. 2015(08)
[4]不同来源冻融精子行卵胞浆内单精子注射的临床结局分析[J]. 宋文妍,赵万里,杨庆岭,孙莹璞,姚桂东,杨洪毅,金海霞,辛志敏.  郑州大学学报(医学版). 2014(06)



本文编号：3654037