甲状腺转录因子-1单克隆抗体的制备及其应用价值分析

发布时间：2022-08-10 13:44

　　目的制备甲状腺转录因子-1（TTF-1）单克隆抗体,为临床工作及后续研究奠定基础。方法以聚合酶链反应扩增目的基因,并构建TTF-1/p ET32a重组质粒,诱导表达融合蛋白,经镍琼脂糖亲和层析柱洗脱目的蛋白,并将洗脱液经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测蛋白纯度,经过免疫学评价合格后,进行小鼠体内免疫,效价评价后通过细胞融合筛选阳性细胞株,制备分泌TTF-1单克隆抗体,并对得到的抗体进行免疫组化验证。结果获得能稳定分泌TTF-1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,且其产生的抗体与TTF-1抗原具有良好的免疫学反应。结论成功制备出TTF-1单克隆抗体,为进一步提高相关肿瘤的诊断率提供了新的试剂。 

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验动物与细胞株
        1.1.2 主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 TTF-1载体构建
        1.2.2 诱导表达融合蛋白
        1.2.3 目的蛋白表达纯化
        1.2.4 TTF-1重组蛋白的免疫学评价
        1.2.5 杂交瘤细胞株的构建
        1.2.6 单克隆抗体的鉴定
2 结果
    2.1 重组表达载体的构建与鉴定
        2.1.1 重组表达载体的构建
        2.1.2 重组质粒的鉴定
    2.2 重组蛋白的诱导表达和纯化
    2.3 融合蛋白的鉴定
    2.4 小鼠免疫评价结果
    2.5 杂交瘤细胞株的筛选
    2.6 抗体鉴定
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3673743