Kisspeptin/GPR54对大鼠卵巢黄体细胞内分泌功能的影响及其机理

发布时间：2022-09-17 17:34

　　目的： 本研究探讨kisspeptin/GPR54在大鼠卵巢内的表达变化,以及通过离体细胞培养,观察kisspeptin/GPR54对大鼠卵巢黄体细胞内分泌功能的影响及其机理。 方法： 1、通过免疫组织化学、实时定量PCR和免疫印迹技术观察卵巢组织中kisspeptin和GPR54表达水平及表达部位的变化。 2、运用离体细胞培养技术和放射免疫方法观察kisspeptin对基础和hCG诱导的大鼠卵巢黄体细胞内分泌功能的影响。 3、采用免疫印迹技术观察kisspeptin对基础和hCG诱导大鼠黄体细胞孕酮分泌可能激活的信号通路。 结果： 1、实时定量PCR结果表明：未成年大鼠的卵巢组织经促性腺激素处理后,KiSS-1mRNA表达水平明显增加（P＜0.01）,经hCG处理后7天,其表达水平达到高峰。 2、免疫组织化学结果显示：在未成年大鼠,KiSS-1和GPR54蛋白在初级卵泡的颗粒细胞中呈现弱阳性的表达。经促性腺激素处理后,KiSS-1蛋白主要表达于卵泡的膜细胞、间质以及黄体,GPR54蛋白也明显表达于黄体。 3、在离体培养的黄体细胞,... 

【文章页数】：50 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 主要试剂
        2.1.3 主要仪器
        2.1.4 溶液配制
    2.2 方法
        2.2.1 黄体细胞培养
        2.2.2 激素测量
        2.2.3 免疫组织化学
        2.2.4 总RNA的制备和实时荧光定量PCR
        2.2.5 蛋白印迹(Western blotting)实验步骤
        2.2.6 统计学处理
第3章 结果
    3.1 促性腺激素处理后大鼠卵巢KiSS-1 mRNA和蛋白的表达水平及表达部位的变化
    3.2 GPR54蛋白在大鼠卵巢组织中定位及表达水平的变化
    3.3 Kisspeptin-10对基础和hCG诱导的大鼠黄体细胞分泌孕激素和雌二醇的影响
    3.4 Kisspeptin-10对黄体细胞合成类固醇激素相关蛋白的调节作用
    3.5 Kisspeptin-10对hCG诱导大鼠黄体细胞分泌孕酮的作用可能激活的信号通路的影响
    3.6 ERK1/2和Akt抑制剂对kisspeptin-10作用的大鼠黄体细胞孕酮分泌的影响
第4章 讨论
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间的研究成果
综述
    参考文献



本文编号：3679657