Notch1及其配体在诱导B细胞产生抗体中的作用研究

发布时间：2022-11-12 13:34

　　背景作为体液免疫的一部分,B细胞在机体适应性免疫调节中具有重要作用,机体产生的抗体（Antibody,Ab）在感染性疾病、肿瘤、自身免疫病和移植排斥中扮演重要角色。抗体是由B细胞分化、发育而来的浆细胞所分泌的。B细胞的分化发育和活化过程受许多信号通路的调节,例如 PI3K（Phosphoinositide 3-kiase）信号通路,NF-κB（（Nuclearfactor of kappa B）信号通路,BCR（B-cell receptor）信号通路和Notch信号通路,其中Notch信号通路在B细胞中的功能是当前的研究热点之一。早在1917年,遗传学家Thomas Hunt Morgan和他的同事在具有残缺翅膀表型的果蝇中首次描述了 Notch基因,Notch受体是一类高度保守的跨膜蛋白,在结构上分为胞外区（NEC）,跨膜区（NTM）和胞内域（NICD）,哺乳类动物Notch受体家族有四个成员,分别为Notch1-4,可与五个配体相结合（Delta-like1,3,4和Jagged1,2）,Notch信号通路的激活起始于邻近细胞表面的配体-受体相互作用,进而影响目的基因的转录。目前... 

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
前言
1 材料和方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验用动物
        1.1.2 主要试剂
        1.1.3 引物设计
        1.1.4 常用试剂的配制
    1.2 方法
        1.2.1 小鼠的繁殖
        1.2.2 小鼠基因型鉴定
        1.2.3 蛋白质免疫印迹实验(Western blotting)
        1.2.4 从细胞中提取总RNA
        1.2.5 将RNA反转录为cDNA
        1.2.6 Real-time Q-PCR
        1.2.7 流式细胞术实验
        1.2.8 酶联免疫吸附实验
2 实验结果
    2.1 Notch1在LPS刺激的CD19~(hi)B细胞上高表达
    2.2 用CD19cre体系会使LPS刺激活化的B细胞上Notch1表达下降
    2.3 B细胞特异性敲除Notch1后,用LPS刺激B细胞活化,抗体的产生减少
    2.4 B细胞上Notch1敲除后,全脾细胞用LPS刺激培养后抗体的产生不受影响
    2.5 B细胞上Notch1敲除后不影响实验性变态反应性脑脊髓膜炎(EAE)小鼠抗体的产生
    2.6 将Notch1蛋白与特异性敲除Notch1的B细胞共培养,用LPS刺激培养,可促进抗体的产生
3 讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢
在读期间参加学术活动及研究成果



本文编号：3706464