JNK/SAPK、P38信号转导通路在高渗透压介导髓核细胞凋亡中的作用

发布时间：2022-12-04 00:07

　　目的观察高渗透压对兔髓核细胞活性的影响及JNK/SAPK、P38信号转导通路在此过程中的作用。 方法不同渗透压及时间段处理髓核细胞后采用MTT实验检测细胞活性并运用流式细胞仪检测髓核细胞凋亡情况,同时利用免疫荧光和Western blot技术检测磷酸化P38丝裂原活化蛋白激酶（Phospho-P38mitogen-activated protein kinases, P-P38MAPK）、磷酸化JNK/SAPK激酶（Phospho-c-Jun N-terminal kinases/Stress-activated protein kinases, P-JNK/SAPK）的亚细胞定位及表达水平,观察其对髓核细胞凋亡的影响。 结果高渗透压（600m0sm）可导致髓核细胞显著凋亡及P-P38MAPK. P-JNK/SAPK蛋白表达水平改变。600m0sm各实验组凋亡细胞均与对照组有明显统计学意义（P＜0.01）,相应阻断组凋亡细胞明显减少,400m0sm各实验组和阻断组凋亡细胞与对照组相比均无明显差异；免疫荧光结果显示P-P38MAPK、P-JNK/SAPK在髓核细胞质和细胞核中均有... 

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【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
引言
第1章 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 实验动物
        1.1.2 实验试剂
        1.1.3 实验仪器
    1.2 实验方法
        1.2.1 兔髓核细胞的分离和培养
        1.2.2 调整培养液渗透压
        1.2.3 实验分组
        1.2.4 实验阻断模型的建立
        1.2.5 细胞活性检测
        1.2.6 流式细胞仪检测细胞凋亡
        1.2.7 免疫荧光双标记
        1.2.8 Western Blot
    1.3 统计学处理
第2章 实验结果
    2.1 髓核细胞培养
    2.2 MTT检测髓核细胞活力
    2.3 AnnexinV/PI染色流式细胞仪检测兔髓核细胞凋亡率
    2.4 P-P38MAPK、P-JNK/SAPK在髓核细胞内的定位及表达
    2.5 高渗透压刺激P-P38MAPK、P-JNK/SAPK蛋白表达变化
第三章 讨论
第四章 结论
参考文献
文献综述
    文献综述参考文献
攻读学位期间的研究成果
附录
致谢



本文编号：3707240