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miR-20a-5p通过靶向Klf3调控小鼠骨髓间充质干细胞成脂分化的研究

发布时间:2022-12-11 09:26
  目的:MicroRNA(miRNA)是一类长约19~22个核苷酸的内源性单链非编码RNA,广泛存在于动植物和病毒中,通过与靶基因m RNA完全或非完全碱基互补配对在转录后水平调控基因的表达。miRNA广泛参与调控机体的发育和各种内稳态事件。大量研究表明miRNA可以通过调控与成脂分化相关的许多转录因子来影响骨髓间充质干细胞的成脂分化。在本室的前期研究中我们已经证实miR-20a-5p可以通过靶向赖氨酸特异性去甲基化酶6b(lysine-specific demethylase 6b,Kdm6b)和转化生长因子-β受体II(transforming growth factor beta receptor II,Tgfbr2)促进ST2骨髓基质细胞系及C3H10T1/2间充质干细胞系的成脂分化。然而,其在调控小鼠原代骨髓间充质干细胞(bone marrow derived stromal cells,BMSCs)成脂分化中的作用和分子机制尚不完全清楚。本研究将探讨miR-20a-5p对小鼠原代BMSCs成脂分化的影响,并进一步阐明其发挥作用的分子机制。方法:1、分离并培养小鼠原代BMSCs... 

【文章页数】:104 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
中文摘要
Abstract
缩略语
前言
    研究现状、成果
    研究目的、方法
一、miR-20a-5p对小鼠BMSCs成脂分化的影响
    1.1 对象和方法
        1.1.1 实验材料
        1.1.2 实验方法
    1.2 结果
        1.2.1 小鼠原代BMSCs的培养和诱导成脂分化
        1.2.2 小鼠BMSCs诱导成脂分化过程中miR-20a-5p及成脂标志基因的表达变化
        1.2.3 miR-20a-5p过表达和sponge慢病毒的包装
        1.2.4 miR-20a-5p过表达对小鼠BMSCs成脂分化的影响
        1.2.5 miR-20a-5p的敲减对小鼠BMSCs成脂分化的影响
    1.3 讨论
    1.4 小结
二、miR-20a-5p调控小鼠BMSCs成脂分化的机制研究
    2.1 对象和方法
        2.1.1 实验材料
        2.1.2 实验方法
    2.2 结果
        2.2.1 miR-20a-5p靶基因的预测
        2.2.2 miR-20a-5p候选靶基因的鉴定
        2.2.3 miR-20a-5p对Klf5、Klf7基因表达的影响
        2.2.4 Klf3沉默表达对小鼠BMSCs成脂分化的影响
        2.2.5 拯救实验
        2.2.6 同时过表达Klf3、Kdm6b和Tgfbr2对miR-20a-5p调控小鼠BMSCs成脂分化的影响
    2.3 讨论
    2.4 小结
结论
参考文献
发表论文和参加科研情况说明
综述 microRNA调控间充质干细胞成脂分化的研究进展
    综述参考文献
致谢
个人简历


【参考文献】:
期刊论文
[1]PPARγ在脂肪生成中的遗传和表观遗传调控[J]. 崔婷婷,邢天宇,褚衍凯,李辉,王宁.  遗传. 2017(11)



本文编号:3718534

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