人骨髓间充质干细胞衰老过程DNA甲基化变化研究

发布时间：2023-01-31 03:26

　　表观遗传学的改变对生物体的基因表达调控起重要作用,而生物体衰老的过程中会伴随着DNA甲基化与去甲基化修饰等表观遗传学的改变。衰老与甲基化修饰两者相互作用影响。而间充质干细胞（mesenchymal stem cells,MSCs）虽然在体外培养增殖能力极强,但在有限次数传代后,MSCs出现增殖抑制等衰老特征,其形态、生物学特征以及表观遗传特征产生了不同程度的变化。细胞增殖抑制的出现以及增殖过程表观遗传学的改变这两个因素都为MSCs的临床应用增加了难度和不确定因素。因此本文希望通过检测MSCs在体外增殖过程中细胞的衰老表现以及DNA甲基化与羟甲基化的变化情况,进而了解MSCs衰老过程中DNA表观遗传学的改变,以及衰老对于其DNA甲基化与羟甲基化的影响,为MSCs“永生化”提供表观遗传学的研究基础。本课题将从人骨髓中分离并提取MSCs进行培养传代。在传代过程中观察其衰老表现,并通过建立超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）检测5-甲基脱氧胞苷（5mdC）与5-羟甲基脱氧胞苷（5hmdC）的方法观察MSCs在体外增殖过程中细胞的全基因组DNA甲基化与羟甲基化的变化情况,为MSCs衰老... 

【文章页数】：86 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
缩略语表
摘要
ABSTRACT
前言
    1 研究背景
    2 研究内容及意义
第一部分 从人骨髓中分离MSCS进行传代培养并评价其生物学特性
    1 材料与仪器
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
    5 小结
第二部分 建立超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)检测全基因组DNA中5-甲基脱氧胞苷(5MDC)与5-羟甲基脱氧胞苷(5HMDC)水平的方法..
    1 材料与仪器
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
    5 小结
第三部分 MSCS体外增殖过程中的动态衰老变化以及全基因组DNA甲基化与羟甲基化的变化情况
    1 材料与仪器
    2 实验方法
    3 实验结果
    4 讨论
    5 小结
全文总结
展望
参考文献
综述
    参考文献
攻读硕士学位期间发表的学术论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]Oct4过表达对小鼠胚胎干细胞稳定性的影响[J]. 郁烔峰,夏梦,李冬娜,任立成.  医学理论与实践. 2017(21)



本文编号：3733682