SPHK1/S1P-SIRT1信号对HUVEC细胞功能的调控作用及机制研究

发布时间：2023-02-12 13:00

　　目的：研究鞘氨醇激酶1/1-磷酸鞘氨醇(sphingosine kinases 1/ sphingosine-1-phospate, SPHKI/S1P)信号及沉默信息调节因子2相关酶类1(Silent mating type information regulation 2 homolog-1, SIRT1)对脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell, HUVEC)细胞功能的影响并探讨SPHK1与SIRT1的相互关系及其作用机制。方法：利用酶切、回收、连接等方法构建同时携带有SPHK1干涉序列与绿色荧光蛋白的慢病毒载体；CCK8检测细胞的增殖能力；Transwell小室检测细胞的迁移能力；流式细胞仪检测细胞周期及细胞的凋亡情况；Matrigel胶检测细胞的管状结构形成能力；实时定量PCR (Real-time PCR, RT-PCR)检测细胞内SPHK1及SIRT1的基因表达水平；Western Blot检测细胞SPHK1、SIRT1的蛋白表达水平及ERK、AKT、P38 MAPK及NF-KappaB的磷酸化水平。结果：成功构建了同时...

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
缩略词表
前言
第一部分 pLKO.l-shSPHKl-GFP重组质粒的构建
    1 材料
    2 方法
    3 结果
第二部分 SPHK1/S1P与SIRT1相互关系的研究及其对HUVEC生物学特性的影响
    1 材料
    2 方法
    3 结果
第三部分 SPHK1调控SIRT1表达从而影响HUVEC细胞迁移能力的机制研究
    1 材料
    2 方法
    3 结果
结论与讨论
参考文献
攻读学位期间的研究成果
致谢



本文编号：3741155