X线辐照对小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1增殖及RANTES表达的影响

发布时间：2023-02-22 18:58

　　目的探讨X线辐照对体外培养小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1增殖及其分泌蛋白的影响,为放射性骨损伤的防治提供研究基础。方法取对数生长期的小鼠成骨前体细胞MC3T3-E1,按辐照剂量分成0 Gy对照组、2 Gy组、4 Gy组、8 Gy组,使用6 MV直线加速器分别予以相应剂量的X线辐照,观察辐照后细胞形态的改变,CCK-8法检测细胞增殖情况,检测辐照后7 d细胞内碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性;收集各组细胞上清,采用高通量蛋白质芯片技术检测分泌蛋白的表达情况,筛选出放射性损伤特异性的差异蛋白,并通过酶联免疫吸附实验进行验证。结果辐照后MC3T3-E1细胞胞体肿大,细胞核变大。与对照组相比,从3 d开始4 Gy和8 Gy组细胞增殖速度降低,差异有统计学意义(P<0.05),并且增殖降低呈现辐照剂量依赖性。辐照后培养7 d,各辐照组细胞内ALP活性均比对照组低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,辐照后细胞上清共发现36个差异表达蛋白,其中受激活调节正常T细胞表达和分泌因子(regulated upon activation,nor...

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【文章目录】：
1 材料和方法
    1.1 主要试剂与仪器设备
    1.2 细胞培养及处理
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 细胞辐照
    1.3 细胞增殖实验
    1.4 细胞内碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性测定
    1.5 高通量蛋白芯片筛选表达差异蛋白
    1.6 ELISA验证差异蛋白表达水平
    1.7 统计学处理
2结果
    2.1辐照后细胞形态改变
    2.2 辐照对成骨细胞增殖的影响
    2.3 辐照对成骨细胞内ALP活性的影响
    2.4 细胞上清液中差异蛋白的表达水平
    2.5 细胞上清液中RANTES表达水平
3 讨论



本文编号：3748114