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siRNA对家蝇拟除虫菊酯抗性基因cyp6d1沉默效果研究

发布时间:2023-04-30 02:09
  目的利用siRNA对家蝇拟除虫菊酯抗性基因cyp6d1的表达进行干扰,并对基因沉默效果进行评价。方法人工合成家蝇cyp6d1基因的siRNA,编号为C474、C1226、C1446;采用微量注射方式将其导入实验室筛选出的cyp6d1基因高表达家蝇品系个体中;采用荧光染料PCR法对RNA干扰处理组和对照组家蝇体内mRNA的表达量进行定量测定,观察不同处理组cyp6d1基因的沉默效应。结果微量注射导入C474、C1226、C1446和阴性对照的家蝇cyp6d1基因mRNA表达量组间差异有统计学意义(F=14.948,P=0.000),组内比较显示各处理组与阴性对照组mRNA的表达量差异均有统计学意义。注射C474、C1226、C1466的处理组之间差异无统计学意义(F=2.615,P=0.101)。相对于阴性对照,注射了C474、C1226、C1466的处理组mRNA抑制率分别为63.74%、72.28%和65.99%。结论采用微量注射方式将人工合成的siRNA C474、C1226、C1446导入家蝇体内,可以在mRNA水平上对其cyp6d1基因的表达实现有效沉默。

【文章页数】:5 页

【文章目录】:
1 材料与方法
    1.1 试剂
    1.2 仪器
    1.3 试虫
    1.4 cyp6d1基因干扰
        1.4.1 siRNA的设计与合成
        1.4.2 干扰RNA的导入
        1.4.3 RNA干扰效果评价
    1.5 统计学处理
2 结果
    2.1 siRNA导入
    2.2 cyp6d1基因沉默效果评价
3 讨论



本文编号:3806202

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