Coronin-1siRNA在巨噬细胞中的特异性表达及抗耻垢分枝杆菌感染的实验研究

发布时间：2023-05-13 05:18

　　目的:巨噬细胞Coronin-1(冠蛋白-1)与Mtb(结核分枝杆菌)逃逸巨噬细胞的杀伤有关。本研究构建巨噬细胞特异性SP107-C3启动子调控表达Coronin-1 si RNA的p S-EGFP-SP-Coronin-1质粒,研究其特异性敲减巨噬细胞Coronin-1蛋白对RAW264.7小鼠巨噬细胞的吞噬功能及抗耻垢分枝杆菌效应的影响。方法:1.构建pS-EGFP-SP-EGFP、pS-EGFP-SP-Coronin-1重组质粒,分别转染RAW264.7、A549及HEK293细胞,检测其巨噬细胞特异性启动表达si RNA的能力。2.以pS-EGFP-SP-Coronin-1重组质粒转染RAW264.7细胞,用RT-PCR法和Western-blot两种方法检测重组质粒转染前后的RAW264.7细胞Coronin-1的表达水平,明确重组质粒敲减Coronin-1的效率。3.用耻垢分枝杆菌分别感染pS-EGFP-SP-Coronin-1重组质粒转染细胞、pS-EGFP-SP空质粒转染细胞和空白RAW264.7细胞,通过感染细胞内耻垢分枝杆菌菌落总数评估巨噬细胞转染质粒前后对细菌的吞...

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【学位级别】：硕士

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英汉缩略语名词对照
摘要
Abstract
前言
第一部分 重组质粒构建
    1.材料和方法
    2.结果与分析
    3.结论
第二部分 重组质粒功能鉴定
    1.材料和方法
    2.结果与分析
    3.结论
第三部分 重组质粒“细胞水平”抗分枝杆菌的研究
    1.材料和方法
    2.结果与分析
    3.结论
全文讨论
全文总结
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
攻读硕士期间发表的文章



本文编号：3815381