长期饮食限制对衰老相关糖脂代谢的影响及其机制研究

发布时间：2023-08-01 19:15

　　目的:衰老是一个复杂的生命过程,是引起代谢性疾病最主要的原因之一。糖脂代谢功能紊乱与肝脏细胞的衰老有着密切的联系。我们通过构建自然衰老模型,并且对中年大鼠进行了长期的饮食限制干预。探讨了衰老对糖脂代谢的影响以及长期的饮食限制对衰老相关糖脂代谢的影响及其可能机制,初步探索了PP2A甲基化和GcK相关基因在其中可能的调控作用。方法:1.自然衰老及长期饮食限制模型建立(1)分组:年轻组(5个月龄),老龄组(27个月龄),饮食限制组(12月龄大鼠饮食限制15个月)。(2)体重观察:每3个月测量一次。(3)大鼠肝脏组织切片HE染色观察。2.饮食限制对衰老相关糖代谢的影响及其机制(1)使用便携式血糖仪检测大鼠禁食16h后及进食前后血糖值。(2)蒽酮法检测肝脏糖原含量。(3)实时荧光定量PCR检测糖异生相关基因Pc,PCK2,G6pc,PCK1。3.饮食限制对衰老相关脂代谢的影响及其机制(1)全自动血生化分析仪检测血脂含量。(2)异丙醇提取肝脏甘油三酯并检测大鼠肝脏甘油三酯含量。(3)实时荧光定量PCR检测脂肪氧化相关基因PPara,Acot1和Acadl的mRNA表达量。4.年龄和饮食限制对PP2...

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引言
    1.衰老、饮食限制
    2.肝脏对糖脂代谢的调节作用
        2.1. 糖原代谢
        2.2、甘油三酯代谢
    3.PP2A与肝脏糖脂代谢
材料和方法
    1.材料
        1.1 实验动物与饲料
        1.2 主要试剂
        1.3 引物
        1.4 主要仪器
        1.5 试剂配制
    2.方法
        2.1 动物饲养及分组
        2.2 脏器系数
        2.3 肝组织糖原含量的测定
        2.4 肝脏中甘油三酯的测定
        2.5 食物耐受性实验
        2.6 血生化指标检测
        2.7 肝组织HE染色
        2.8 肝组织RNA分离纯化和q RT-PCR检测基因表达量
        2.9 肝组织蛋白免疫印迹检测基因蛋白表达量
        2.10 统计分析
结果
    1.自然衰老模型长期饮食限制模型建立
        1.1 年龄和饮食限制对大鼠体重的影响
        1.2 肝重和肝脏系数
        1.3 肝脏组织形态学变化
    2.饮食限制对衰老相关的糖代谢的影响
        2.1 空腹血糖及进食后血糖变化值
        2.2 年龄与饮食限制对肝糖储备的影响
        2.3 饮食限制对衰老相关糖异生的影响
    3.饮食限制对衰老相关脂代谢的影响
        3.1 与饮食限制对血脂的影响
        3.2 肝脏甘油三酯的关系及饮食限制对其影响
        3.3 肝脏脂肪氧化的关系及饮食限制对其影响
    4.年龄和饮食限制对PP2A去甲基化状态的影响
    5.年龄与饮食限制对Gck相关基因的影响
讨论
结论
存在的问题
展望
综述
参考文献
附录
致谢
攻读学位期间发表的学术论文



本文编号：3838198