糖氧剥夺/再灌注损伤对人正常肝L02细胞自噬水平的影响

发布时间：2023-09-02 13:17

　　目的探讨糖氧剥夺/再灌注损伤(OGD/R)对人正常肝L02细胞自噬水平的影响。方法体外培养人正常肝L02细胞,制备OGD/R模型,模拟临床的肝脏缺血再灌注损伤。分为5组:正常对照组、OGD 6 h/R 1、3、6、12 h组。随后在倒置显微镜下观察L02细胞形态;采用MTT比色法检测L02细胞的相对增殖情况;Western blot法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1和p62的表达变化。结果与正常对照组相比,随着再灌注时间的延长,OGD/R组处理L02细胞的形态损伤逐渐加剧,增殖活性逐渐降低,呈时间依赖性。自噬相关蛋白LC3和Beclin-1在OGD 6 h/R 1 h即有所增高,随着再灌注时间的延长,LC3的表达量逐渐增高并于再灌注6 h时大量增加,于再灌注12 h时达到最大值(P<0.01);Beclin-1蛋白的表达量随再灌注时间的延长逐渐增加于6 h和12 h急剧增加(P<0.01);p62蛋白于OGD 6 h/R 1 h时和3 h无明显变化,而在再灌注6 h时开始急剧增加,于12 h达到最大值(P<0.01)。结论 OGD/R可诱导人正常肝L02细胞自...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞及主要试剂
    1.2 方法
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 OGD/R损伤模型的建立
        1.2.3 MTT法检测细胞存活率
        1.2.4 Western blot法检测自噬相关蛋白Beclin-1、LC3、p62的表达水平
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 OGD/R损伤对人正常肝L02细胞形态的影响
    2.2 OGD/R损伤对人正常肝L02细胞增殖活性的影响
    2.3 OGD/R对人正常肝L02细胞自噬相关蛋白Beclin-1表达的影响
    2.4 OGD/R对人正常肝L02细胞自噬相关蛋白LC3表达的影响
    2.5 OGD/R对人正常肝L02细胞自噬相关蛋白LC3、Beclin-1和p62的表达的影响
3 讨论



本文编号：3845270