核因子-κB信号通路参与人骨髓间充质干细胞增殖/凋亡调节

发布时间：2023-10-12 04:35

　　目的:探讨核因子кB(Nuclear Factor-кB,NF-кB)信号通路是否参与调节人骨髓间充质干细胞(human mesenchymal stem cells,hMSCs)的增殖及凋亡作用。 材料和方法:(1)贴壁法获取骨髓间充质干细胞:取股骨头置换或全髋关节置换患者股骨髓腔内骨髓血混合物,通过差速贴壁法分离培养纯化鉴定骨髓间充质干细胞,进行形态学观察。(2)流式细胞术鉴定表面分子表达:采用细胞表面分子标志流式抗体荧光染色后,用流式细胞方法检测细胞表面分子表达。(3)应用蛋白凝胶电泳(western blotting)的方法检测药物干预(激活剂脂多糖,Lipopolysaccharides,LPS;抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐,PDTC)后NF-кB表达水平以及增殖、凋亡相关蛋白变化。(4)另用蛋白凝胶电泳分别检测相关蛋白如PARP、PCNA等蛋白表达的变化。(5)细胞增殖检测:用MTT比色方法检测骨髓间充质干细胞在LPS及PDTC的作用下其增殖的变化。(6)细胞凋亡检测:通过将细胞标记PI后进行流式细胞分析检测在NF-кB信号通路激活后细胞凋亡变化。 结果:(1)从手术中人股...

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【学位级别】：硕士

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引言
第一部分 骨髓间充质干细胞的分离培养纯化鉴定
    1.1 实验材料与主要试剂及仪器
    1.2 主要实验方法
    1.3 实验结果
    1.4 讨论
    1.5 小结
第二部分 NF－кB 参与间充质干细胞增殖调节
    2.1 实验材料与主要试剂及仪器
    2.2 主要实验方法
    2.3 实验结果
    2.4 讨论
    2.5 小结
结论
参考文献
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3853462