NKT细胞对C57BL/6小鼠胚胎着床和发育的影响及其免疫机制的初步研究

发布时间：2023-10-18 18:47

　　目的： 为了探究NKT细胞对C57BL/6小鼠胚胎着床和发育的影响及其可能的免疫机制,通过刺激NKT细胞增殖活化,观察胚胎着床及发育情况,同时检测其分泌的细胞因子IL-10和TNF-α变化,以分析其在母体子宫内膜免疫微环境中的调节作用。 方法： 1、在小鼠胚胎着床前后的不同时间腹腔注射不同浓度的抗原KRN7000刺激NKT细胞活化,整体观察胚胎着床和发育情况。 2、在小鼠胚胎着床前后的不同时间腹腔注射不同浓度的抗原KRN7000刺激NKT细胞活化,用RT-PCR法半定量检测NKT细胞活化后子宫蜕膜组织中IL-10和TNF-αmRNA的表达量。 结果： 1、分别给妊娠D3(着床前一天)和妊娠D6(着床后)小鼠腹腔注射不同浓度(0,1.25,2.5,5μg/ml)的抗原KRN7000每只0.4m1,于妊娠D8观察着床胚胎数及其发育情况,结果显示于妊娠D3给药后,各实验组胚胎着床数减少,与对照组相比存在显著差异(P<0.05),着床后的胚胎发育不良,但不同实验组之间不存在显著差异(P>0.05)。于妊娠D6给药后,各实验组均诱导胚胎流产,胚胎吸收率均达100%。 2、分别给妊娠D...

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

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摘要
ABSTRACT
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 材料
        2.1.1 实验动物
        2.1.2 试剂
            2.1.2.1 试剂
            2.1.2.2 引物合成
        2.1.3 主要仪器
    2.2 方法
        2.2.1 动物模型的制备
        2.2.2 KRN7000对小鼠胚胎着床和发育的影响
        2.2.3 RT-PCR检测子宫蜕膜中TNF-α和IL-10 mRNA的表达
            2.2.3.1 实验分组
            2.2.3.2 提取小鼠子宫蜕膜中总RNA
            2.2.3.3 RNA逆转录
            2.2.3.4 PCR扩增
            2.2.3.5 琼脂糖凝胶电泳及分析
    2.3 统计学分析
第3章 结果
    3.1 KRN7000对小鼠胚胎着床和发育的影响
        3.1.1 妊娠D3给药后小鼠的着床胚胎数及胚胎发育情况
        3.1.2 KRN7000对早孕小鼠胚胎的影响
    3.2 KRN7000对妊娠D4子宫蜕膜中IL-10和TNF-αmRNA表达的影响
        3.2.1 KRN7000对妊娠D4子宫蜕膜组织中IL-10 mRNA表达的影响
        3.2.2 KRN7000对妊娠D4子宫蜕膜组织中TNF-α mRNA表达的影响
    3.3 KRN7000对妊娠D7子宫蜕膜中IL-10和TNF-α mRNA表达的影响
        3.3.1 KRN7000对妊娠D7子宫蜕膜组织中IL-10的mRNA表达的影响
        3.3.2 KRN7000对妊娠D7子宫蜕膜组织中TNF-α的mRNA表达的影响
    3.4 NKT细胞活化后TNF-α/IL-10比值的变化
        3.4.1 不同浓度抗原激活NKT细胞后,妊娠D4 TNF-α/IL-10的变化
        3.4.2 不同浓度抗原激活NKT细胞后,妊娠D7 TNF-α/IL-10的变化
第4章 讨论
    4.1 NKT细胞对胚胎着床的意义
    4.2 NKT细胞对着床前后子宫蜕膜中IL-10和TNF-α分泌的影响
    4.3 NKT细胞对小鼠子宫蜕膜中TH1/TH2平衡的影响
第5章 结论
致谢
参考文献
攻读学位期间研究成果
综述 细胞因子对胚胎着床影响的研究进展
    参考文献



本文编号：3854985