噬菌体展示HIV-1 Tat38-61（51N/55N）碱性区突变体库的构建及亲和筛选

发布时间：2023-11-04 12:38

　　第一部分噬菌体展示HIV-1 Tat38-61(51N/55N)碱性区突变体库的构建 目的用噬菌体展示的方法构建Tat38-61(51N/55N)碱性区突变体文库,进一步研究HIV-1 Tat38-61表位的分子进化筛选。方法采用含随机核苷酸序列的引物,通过Overlap PCR的方法获得51和55位氨基酸随机突变的全长Tat编码序列,再以此为模板PCR扩增出两端含有Xba I识别序列的Tat38-61突变体片段HIV-1 Tat38-61(51N/55N),克隆至噬菌体展示载体pCANTAB5S上,转化大肠杆菌TG1,经M13K07辅助噬菌体拯救,构建噬菌体展示Tat38-61(51N/55N)碱性区突变体文库。结果成功构建噬菌体展示Tat38-61(51N/55N)碱性区突变体文库,结果显示文库的库容量为5.0×10⁶,滴度为2.65×10¹² TU/ml,阳性克隆率为56.50%;序列分析显示文库中51、55位核苷酸与氨基酸均呈随机性分布。结论所建文库达到进行分子进化筛选的要求,为获得可用作疫苗候选物的新型Tat突变体奠定基础。 第二部...

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

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缩略词表
中文摘要
英文摘要
前言
第一部分：HIV-1 Tat38-61(51N/55N)碱性区突变体文库的构建
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
    4 结论
第二部分：HIV-1 Tat38-61(51N/55N)碱性区突变体文库的亲和筛选
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
    4 结论
第三部分：HIV-1 Tat38-61(51N/55N)突变体蛋白的构建表达
    1 材料与方法
    2 结果
    3 讨论
    4 结论
总结
参考文献
附录
致谢
综述
    参考文献



本文编号：3860322