人胚胎干细胞悬浮培养体系建立

发布时间：2023-11-15 18:08

　　人胚胎干细胞(human Embryonic Stem Cells,hESCs)是一类具有多向分化能力及体外增殖能力的干细胞,因而hESC拥有巨大的临床应用前景。随着干细胞相关研究的快速发展,干细胞的临床转化治疗已在再生医学领域占据了举足轻重的地位。尤其是在许多常规手段无法解决的重大科学问题中,如脊髓损伤、癌症、年龄相关性视网膜变性等疾病,干细胞治疗取得了令人鼓舞的效果。随着干细胞研究的深入与拓展,常规的二维细胞培养方式已远远不能满足现有的研究和临床转化需求。自然界中的细胞生存在三维的体内环境中,而二维培养会束缚干细胞的生长与分化,因而干细胞分化获得的功能细胞中,均存在着功能不健全的问题,如分化获得的肝细胞酶表达水平,不如体内获得的原代肝细胞。因此,利用三维培养模式模拟体内细胞生长环境,进行细胞的体外培养和分化已成为当今主流趋势。除此之外,移植一位患者,往往需要10⁹数量级的细胞。常规的干细胞制备手段,需要消耗大量的人力物力,这不仅将增加干细胞治疗的成本,而且在制备过程中增加了污染风险,干细胞制品批次间的稳定性也会因技术人员技术水平的差异而变得不稳定。3D培养方式...

【文章页数】：42 页

【学位级别】：硕士

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摘要
英文摘要
1 引言
    1.1 人胚胎干细胞分离及培养研究进展
        1.1.1 多能干细胞的分类及定义
        1.1.2 人胚胎干细胞分离的研究历史
        1.1.3 人胚胎干细胞培养体系的发展
    1.2 干细胞临床应用的发展
    1.3 干细胞规模化培养的发展
    1.4 研究的目的和意义
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 实验试剂
        2.1.2 实验耗材
        2.1.3 实验仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 人胚胎干细胞2D复苏、培养和传代
        2.2.2 hESCs的悬浮培养、传代、冻存和复苏
        2.2.3 hESCs在细胞培养袋中的培养、传代、冻存和复苏
        2.2.4 悬浮培养的hESCs的鉴定
3 结果与分析
    3.1 建立hESCs在超低贴附培养皿中的悬浮培养体系
    3.2 hESCs悬浮培养体系的建立
    3.3 大规模悬浮培养的hESCs的鉴定
4 讨论
5 结论
致谢
参考文献
附录
攻读硕士学位期间发表的学术论文



本文编号：3864237