低氧刺激THP-1细胞炎症因子的表达及其相关通路的研究

发布时间：2024-01-29 19:50

　　目的观察低氧是否促进人单核细胞炎症因子的分泌,以及探讨其是否通过PI3K/Akt和低氧诱导因子(HIF-1α)信号通路而发挥作用。方法 1体外低氧(1%O2)培养人源单核细胞系THP-1,24 h;2分别加入PI3K抑制剂(LY294002)和HIF-1α抑制剂(KC7F2)预处理THP-1细胞后再进行低氧干预;3在常氧下,分别加入Akt激动剂(胰岛素)和HIF-1α激动剂(二甲氧乙二酰甘氨酸,DMOG)对THP-1细胞进行干预。Western blot检测p-Akt和HIF-1α蛋白表达的水平,ELISA法检测IL-1β和TNF-α分泌的变化。结果与对照组(常氧培养)比较,低氧干预后THP-1细胞p-Akt、HIF-1α的蛋白表达增加,IL-1β、TNF-α分泌增加,差异有统计学意义(P<0.05);与低氧组(低氧培养)比较,PI3K抑制剂预处理能显著降低p-Akt、HIF-1α的蛋白表达,HIF-1α抑制剂预处理能降低HIF-1α的蛋白表达,但不影响p-Akt表达水平,两种药物预处理都能减少IL-1β和TNF-α分泌,差异有统计学意义(P<0.05);与对照组比较,Ak...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 主要试剂
    1.2 细胞培养、干预和分组
        1.2.1 细胞培养
        1.2.2 实验分组
        1.2.3 细胞干预
    1.3 Western Blot检测各组细胞p-Akt、Akt、HIF-1α蛋白表达
    1.4 ELISA测细胞培养上清中IL-1β和TNF-α表达水平
    1.5 统计学处理
2 结果
    2.1 低氧环境下抑制HIF-1α和PI3K/Akt对THP-1细胞炎症相关通路和炎症因子的影响
        2.1.1 低氧环境下KC7F2及LY294002对THP-1细胞p-Akt、HIF-1α蛋白表达水平的影响
        2.1.2 低氧环境下KC7F2及LY294002对THP-1细胞IL-1β和TNF-α分泌水平的影响
    2.2 上调Akt及HIF-1对THP-1细胞炎症相关通路和炎症因子的影响
        2.2.1 胰岛素干预及DMOG干预对THP-1细胞p-Akt、HIF-1α蛋白表达水平的比较
        2.2.2 胰岛素及DMOG干预对THP-1细胞IL-1β和TNF-α分泌水平的影响
3 讨论



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