组织工程化胰岛的构建与初步评价

发布时间：2024-02-01 14:27

　　目的:利用胰腺组织裂解液诱导BMSCs定向分化为胰岛样结构。对胰岛样结构进行鉴定和初步评价,同时探讨细胞分化、发育过程中,形态的变化与相关基因表达规律的关联性。方法:使用胰腺组织裂解液做为诱导剂,构建微环境,BMSCs做为种子细胞,构建组织工程化胰岛;倒置显微镜下观察形态、结构的变化。石蜡包埋组织切片HE染色观察组织结构、细胞分布;以DTZ染色筛选细胞团;Mallory染色初步检定细胞成分;SEM、TEM观察超微结构。免疫荧光组织化学法检测相关蛋白(胰岛素、胰高血糖素、C肽、生长抑素、vEGF、vWF、Nestin、CK-19、Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白、Pdx-1、Ngn3、MafA)。根据细胞分化过程中的形态变化规律,将分化过程分为三个阶段(Induced cells、Islet-like cells、Islet-like clusters),采用q RT-PCR检测三个阶段Pdx-1、Ngn3、MafA、Insulin、Glucagon。结果:1.组织工程化胰岛具有结缔组织样被膜包裹,内含α样细胞、β样细胞和δ样细胞等胰岛内分泌细胞成分;结构内可见内皮样细胞;同时检测到以Ⅰ型胶原...

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图3CD29、CD90、CD34、CD45流式细胞仪检测Fig3FlowCytometrydetectionofCD29、CD90、CD34、CD45

图3CD29、CD90、CD34、CD45流式细胞仪检测Fig3FlowCytometrydetectionofCD29、CD90、CD34、CD45组织工程化胰岛构建--形态学观察.1光镜观察使用胰腺组织裂解液作为诱导剂，定向诱导BMSCs。诱导第A），....

图5细胞团扫描电镜图

图5细胞团扫描电镜图Fig5SEMforinducedclusters3.2.3透射电镜观察透射电镜观察，内分泌样细胞可分为三种：第一种细胞（图6-A），细胞内可见圆形或细长状线粒体，体积小，散在分布，大小不等、电子密度不一的分泌颗粒，数量多，粗面内质网呈囊管状....

图6透射电镜Fig6TEMA-B:UltrastructureofIslet-likecells;cellnucleusshortforN,roughendoplasmicreticulumshortforER,mitochondriashortforM,zymogengranuleshortforZ,microvillishortforMV.C:Somesecondarylysosomescontainingasecretorygranulecorecanbeseen(a...

31图6透射电镜Fig6TEM-B:UltrastructureofIslet-likecells;cellnucleusshortforN,roughendoplasmicreticulumshortforEitochondriashor....

图7细胞团HE染色

织工程化胰岛的构建与初步评价2018届硕士学位论文.3组织学技术.3.1组织化学与细胞化学技术.3.1.1HE染色HE染色可见：胰岛样结构组织切片中，细胞结构清晰，排列紧质呈腺样分布,细胞核圆或椭圆，位于细胞中央，胞质嗜酸性（图胞团被一层被膜包裹，被膜光滑，有游离....

本文编号：3892272