骨质疏松小鼠模型骨髓间充质干细胞特性的研究

发布时间：2024-04-10 03:42

　　目的探讨骨质疏松小鼠模型骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)生物学特性的改变。方法通过皮下注射地塞米松构建小鼠骨质疏松动物模型(OP组),同时设立对照(NC组),分离OP组及NC组骨髓MSCs进行体外培养;通过流式细胞术检测细胞表面分化抗原;运用CKK-8实验检测细胞增殖活力;通过脱氧核苷酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡水平;运用碱性磷酸酶(ALP)活性检测、油红O染色及Western blot法检测两组细胞成骨分化及脂肪分化能力。结果经过骨组织学检测证明模型建立成功,体外培养OP组及NC组骨髓MSCs细胞形态无差异。OP-MSCs细胞表面分化抗原Scal1及CD44为阳性, CD34及CD11b为阴性,与NC-MSCs相似,但OP-MSCs增殖活力下降(P<0.05);此外两组细胞凋亡水平类似(P>0.05)。成骨分化诱导7 d后OP-MSCs的ALP活性显著低于对照组(P<0.01),21 d后矿化小结明显减少(P<0.001);脂肪分化诱导8 d后OP-MSCs形成更多脂滴(P<...

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物及材料
    1.2 方法
        1.2.1 动物模型建立:
        1.2.2 骨组织学检测:
        1.2.3 MSCs分离培养:
        1.2.4 流式细胞术:
        1.2.5 细胞增殖测定:
        1.2.6 细胞凋亡测定:
        1.2.7 细胞分化诱导:
        1.2.8 Western blot:
        1.2.9 碱性磷酸酶(ALP)活性检测:
        1.2.10 茜素红染色:
        1.2.11 油红O染色:
    1.3 统计学处理
2 结果
    2.1 骨质疏松小鼠模型建立及检测
    2.2 OP-MSCs的干细胞表面分化抗原表达水平检测
    2.3 OP-BMSCs的增殖能力检测
    2.4 OP-MSCs的凋亡水平检测
    2.5 OP-MSCs的多向分化能力检测
    2.6 OP-MSCs中成骨细胞及脂肪细胞转录因子的表达水平
3 讨论



本文编号：3950093