MASP3在补体旁路途径活化中的功能研究

发布时间：2024-05-08 00:48

　　研究目的:补体旁路途径活化或调节异常参与多种疾病的发生和发展,本研究旨在通过甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶3(MASP3)基因敲除小鼠模型的建立及抗MASP3单克隆抗体的制备以明确MASP3在补体旁路途径活化中的作用,并初步探讨MASP3能否作为治疗旁路途径功能异常相关疾病的新靶点。研究方法:1.MASP3基因敲除小鼠的制备和表型初步分析:本研究采用CRISPR Cas9技术制备了MASP3基因敲除小鼠(MASP3^-/-),将特定的crRNA、tracr RNA和Cas9蛋白注射至小鼠受精卵以敲除小鼠MASP1/3编码基因第12外显子的部分序列。因第12外显子含编码MASP3丝氨酸蛋白酶结构域的DNA序列,故成功敲除后的小鼠体内无正常MASP3蛋白表达。在得到F0代小鼠后我们通过PCR以及DNA测序筛选出MASP3基因敲除小鼠。为验证MASP3基因部分敲除后小鼠体内已无MASP3蛋白表达,我们制备了兔抗鼠MASP3多克隆抗体(pAb)并通过western blot检测了F0代小鼠体内MASP3的表达情况。随后我们通过体外旁路途经活性测定试验和红细胞溶解试验检测了...

【文章页数】：80 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
前言
第一部分 MASP3基因敲除小鼠模型的构建及表型初步分析
    1 材料和方法
    2 实验结果
    3 讨论
第二部分 抗鼠MASP3单克隆抗体的制备和鉴定
    1 材料和方法
    2 实验结果
    3 讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
个人简历
致谢



本文编号：3967245