负载pVAX1-wapA的壳聚糖及季铵化壳聚糖纳米粒的制备研究

发布时间：2017-05-26 15:20

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【摘要】：目的制备负载抗龋DNA疫苗pVAX1-wapA质粒的壳聚糖和季铵化壳聚糖纳米粒,优化其制备工艺,测定其细胞转染效率。方法以包封率和粒径为主要指标,单因素法考察载体浓度、pH值、N/P、TPP浓度等因素的影响,RealtimePCR检测细胞对质粒编码蛋白的转录表达水平以评价载质粒纳米粒的促转染作用。结果制得的载DNA疫苗纳米粒粒径均一,形态圆整。壳聚糖(CS)纳米粒粒径为(219.2±18.2)nm,Zeta电位为(24.7±3.5)mV,包封率为91.24%。季铵化壳聚糖(CSTM)纳米粒粒径为(222.5±15.6)nm,Zeta电位为(19.6±1.2)mV,包封率为87.66%。纳米粒可以促进pVAX1-wapA进入细胞,并成功被转录。结论制备的包载pVAX1-wapA的季铵化壳聚糖纳米粒可用于重组基因疫苗的运送。
【作者单位】： 第二军医大学药学院;
【关键词】： DNA疫苗 壳聚糖纳米粒 wapA蛋白 转染 季铵化壳聚糖
【分类号】：R392;TB383.1
【正文快照】： 85%,Mr=50 000~190 000,sigma);琼脂糖(上海生工生物有限公司);溴化乙啶(EB,上海浩然科技有限公司分装);DNAmarker[DL5000,大连宝生物(TAKARA)公司];季铵化壳聚糖(CSTM,实验室合成[10,11],季铵化程度为52%);质粒DNA(由本实验室提取);Hoechst 33258(碧云天生物技术研究所);Triz

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