GⅡ.4诺如病毒抗原ELISA定量检测方法的建立及其应用

发布时间：2017-05-27 17:03

  本文关键词：GⅡ.4诺如病毒抗原ELISA定量检测方法的建立及其应用，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的建立GⅡ.4诺如病毒(Norovirus,No V)抗原ELISA定量检测方法,用于重组GⅡ.4 No V病毒样颗粒疫苗研制中抗原含量检测。方法使用纯化的GⅡ.4 No V病毒样颗粒作为免疫原,分别免疫新西兰大白兔和豚鼠,制备抗血清。以豚鼠抗GⅡ.4病毒样颗粒多抗作为包被抗体,HRP标记的兔抗GⅡ.4病毒样颗粒多抗作为检测抗体,建立GⅡ.4 No V抗原ELISA定量检测方法,确定该方法的线性范围,并对该方法的准确度、精密度、稳定性、特异性进行验证;用建立的方法检测GⅡ.4病毒样颗粒制备过程中间品的抗原含量。结果 GⅡ.4病毒样颗粒内部参考品在15.6~250 ng/ml范围内,线性关系良好,R20.98,高、中、低3个浓度样品回收率在90.9%~110.2%之间,板内和板间精密度试验的CV值均不超过15%;包被微孔板37℃放置6 d,稳定性试验的CV值均小于15%;与GⅡ.4No V病毒样颗粒之外的抗原均无交叉反应;可用于定量检测重组No V抗原制备过程中不同阶段样品。结论建立了GⅡ.4 No V抗原ELISA定量检测方法,该方法准确度、精密度、稳定性、特异性、适用性均良好,为No V病毒样颗粒疫苗的研制提供了质控方法。
【作者单位】： 武汉生物制品研究所有限责任公司病毒性疫苗研究一室;
【关键词】： GⅡ.诺如病毒 酶联免疫吸附试验 定量检测
【分类号】：R392-33
【正文快照】： 诺如病毒(Norovirus,No V)是目前引起非细菌性急性肠胃炎的主要病原体之一,这种病毒具有较高的感染性[1-2],主要通过人与人之间的粪口途径传播,同时也通过污染的食物及污水造成人群密集地方的集体暴发。据估算,全世界每年有22万5岁以下儿童因No V感染而死亡[3]。No V属于杯状

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本文编号：400591