不同亚型甲型流感病毒在单个核细胞内复制情况研究

发布时间：2024-12-25 22:18

　　 目的研究不同亚型的甲型流感病毒在单个核细胞内的复制情况,探讨其免疫应答机制。方法①细胞培养:复苏A549、MDCK细胞后,用DMEM培养液常规培养;外周血分离得到单个核细胞,用RPMI1640常规培养;②空斑形成试验:用空斑试验检测病毒A/Shantou/169/2006(H1N1)和A/Shantou/602/2006(H3N2)的病毒原始滴度;检测流感病毒感染单个核细胞后的病毒滴度变化。结果流感病毒感染单核细胞后,上清液的病毒滴度下降,36、48、72 h病毒滴度<10 PFU/mL;而其细胞裂解液病毒滴度上升,滴度由9.5×10～4 PFU/mL上升至1.63×10～5 PFU/mL。流感病毒感染淋巴细胞,其细胞上清和裂解液病毒滴度均下降,其中上清液H3N2病毒滴度在48、72 h均<10 PFU/mL;裂解液病毒滴度则由4.8×10～5 PFU/mL下降至1.8×10～3 PFU/mL。结论不同亚型的甲型流感病毒在单核细胞和淋巴细胞中的复制存在差异。单核细胞可以吞噬流感病毒但不能直接灭活流感病毒,而淋巴细胞却可以直接抑制流感病毒的复制。

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【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 毒株、细胞
    1.2 主要试剂及仪器
    1.3 A549、MDCK细胞培养
    1.4 单个核细胞培养
    1.5 空斑形成试验(空斑试验)
        1.5.1 H1N1和H3N2原始病毒滴度的测定
        1.5.2 流感病毒感染单个核细胞上清病毒滴度的测定
        1.5.3 流感病毒在无细胞下的滴度变化
        1.5.4 细胞裂解液病毒滴度变化
        1.5.5 A549、MDCK病毒滴度变化
    1.6 统计学分析
2 结 果
    2.1 H1N1、H3N2的原始病毒滴度
    2.2 流感病毒感染单个核细胞上清病毒滴度测定
    2.3 流感病毒无细胞情况下病毒滴度变化
    2.4 细胞裂解液病毒滴度
    2.5 A549、MDCK不同处理后的病毒滴度变化
3 讨 论



本文编号：4020089