针刺对慢性疲劳综合征模型大鼠NK细胞杀伤活性的影响及其miR-34a-5p/ERK/pERK调控机制研究

发布时间：2024-12-24 21:54

　　研究目的:1.探讨针刺对慢性疲劳综合征(CFS)模型大鼠NK细胞杀伤活性(NKCC)的影响;2.探讨针刺是否通过miR-34a-5p/ERK/pERK依赖或非依赖性途径调控NKCC而发挥对CFS的免疫调节作用。研究方法:1.实验一、针刺对CFS模型大鼠NKCC的影响研究:将30只SD大鼠随机分为正常组(A组)、模型组(B组)、针刺组(C组),B、C组通过慢性束缚结合力竭游泳法建立CFS模型,治疗期间A、B组予捆绑固定,C组予针刺“肝俞”、“脾俞”、“肾俞”、“后三里”,得气后平补平泻,留针15分钟,治疗21d后麻醉采血,采用乳酸脱氢酶法检测各组NK细胞活性值。2.实验二、针刺调节CFS模型大鼠NKCC的miR-34a-5p/ERK/pERK机制研究,(1)第一部分:在实验一检测NKCC的同时,采用免疫印迹法检测NK细胞ERK1/2、pERK1/2表达,实时荧光定量PCR法检测NK细胞miR-34a-5p的表达。(2)第二部分:将20只大鼠按相同方法造模后随机分为miRNA拮抗组(D组)、生理盐水组(E组),分别腹腔注射miRNA拮抗剂和等体积生理盐水,予上述针刺干预,21d后麻醉采血,检...

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

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中文摘要
Abstract
中英文缩略词表
引言
实验一: 针刺对CFS模型大鼠NKCC的影响
    技术路线图如下
    1.实验材料
        1.1 实验动物
        1.2 实验试剂
        1.3 主要实验耗材和仪器
    2.实验方法
        2.1 动物分组
        2.2 动物造模
        2.3 干预方法
        2.4 动物取材及标本处理
        2.5 LDH法检测CFS模型大鼠NK细胞杀伤活性
        2.6 统计分析
    3.实验结果
        3.1 造模后结果
        3.2 治疗后结果
实验二：针刺调节CFS模型大鼠NKCC的mi R-34a-5p/ ERK/p ERK机制研究
    第一部分：针刺对CFS模型大鼠mi R-34a-5p/ERK/p ERK通路的影响
        1.实验材料
            1.1 实验动物
            1.2 实验试剂
            1.3 主要实验耗材和仪器
        2.实验方法
            2.1 动物分组
            2.2 动物造模
            2.3 干预方法
            2.4 动物取材及标本处理
            2.5 q RT-PCR检测CFS模型大鼠NK细胞mi R-34a-5p
            2.6 WB检测CFS模型大鼠NK细胞ERK1/2、p ERK1/2 的表达
            2.7 统计分析
        3.实验结果
    第二部分：抑制mi R-34a-5p/ERK/p ERK通路对CFS模型大鼠NKCC针刺调节作用的影响
        1.实验材料
            1.1 实验动物
            1.2 实验试剂
            1.3 主要实验耗材和仪器
        2.实验方法
            2.1 动物分组
            2.2 动物造模
            2.3 干预方法
            2.4 动物取材及标本处理
            2.5 q RT-PCR检测CFS模型大鼠NK细胞mi R-34a-5p
            2.6 WB检测CFS模型大鼠NK细胞ERK1/2、p ERK1/2 的表达
            2.7 LDH法检测CFS模型大鼠NK细胞杀伤活性
            2.8 统计分析
        3.实验结果
讨论
    1.CFS免疫功能异常研究进展
    2.NKCC减弱可能是CFS免疫功能异常的核心标志
    3.miR-34a-5p/ERK/p ERK通路下调可能是CFS患者NKCC减弱的关键原因
    4.针灸治疗CFS免疫功能异常研究进展
    5.本研究方案的确定
        5.1 造模方法的选择
        5.2 针灸干预方案的选择
    6.针刺对CFS模型大鼠NKCC的影响
    7.针刺调控CFS模型大鼠NKCC的mi R-34a-5p/ERK/ p ERK机制探讨
        7.1 针刺对CFS模型大鼠NK细胞mi R-34a-5p的影响
        7.2 针刺对CFS模型大鼠NK细胞ERK1/2、p ERK1/2 的影响
        7.3 抑制mi R-34a-5p/ERK/p ERK通路对针刺调节CFS模型大鼠NKCC作用的影响
结论
不足与展望
致谢
参考文献
综述
    参考文献
附件1：在读期间公开发表的学术论文、专著及科研成果



本文编号：4019980