人脐带间充质干细胞来源外泌体的生物学特性研究

发布时间：2017-05-31 15:08

  本文关键词：人脐带间充质干细胞来源外泌体的生物学特性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的探讨正常人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stromal cells,hUC-MSCs)分泌的外泌体(exosomes)的免疫调节功能及对恶性肿瘤细胞体外增殖的影响。方法采用组织贴壁法分离培养hUC-MSCs,收集第3~6代hUC-MSCs上清液,使用超速离心法分离纯化exosomes;通过电子显微镜观察exosomes形态并分析其直径和直径分布范围等特征;采用流式细胞仪检测其表面hUC-MSCs来源的CD44、CD73标志物。将exosomes与正常人外周血单个核细胞共培养,采用MTT检测exosomes对淋巴细胞增殖的影响,ELISA法检测上清液中IL-4和INF-γ的分泌量。选择慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞株,加入exosomes共培养,应用MTT法、PI/AnnexinⅤ双染流式法检测exosomes对癌细胞体外生长增殖、凋亡的影响。结果组织贴壁法成功分离hUC-MSCs,传代后呈长梭状生长。电镜观察分离得到的exosomes为椭圆形膜性小囊泡,经统计得出其直径在6.8~78.1nm之间,且分布比较集中。流式细胞术测得exosomes高表达黏附分子CD44(54.1%)与干细胞标志物CD73(31.5%),MTT和ELISA检测结果表明,不同浓度的exosomes均抑制外周血单个核细胞增殖且抑制细胞因子IL-4和INF-γ的分泌,呈现剂量依赖性。体外实验表明exosomes对K562细胞株具有抑制增殖、促进凋亡的作用。结论 hUC-MSCs来源的exosomes具有免疫调节作用及抑制K562细胞增殖的作用。
【作者单位】： 蚌埠医学院临床检验诊断学实验中心;蚌埠医学院第一附属医院;蚌埠医学院医学检验教研室;
【关键词】： 间充质干细胞 外泌体 免疫调节 增殖 凋亡
【基金】：蚌埠医学院研究生科研创新计划(No.Byycx1409) 安徽省大学生创业创新项目(No.AH201410367024)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 人脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stromal cells,hUC-MSCs)是一类具有多向分化能力和自我更新能力的干细胞[1-2]。它在胚胎时期的第4~12天进入Wharton’s jelly并且活跃至胎儿娩出。因脐带具有取材容易,不容易被污染,不涉及道德、伦理和法律方面的问题等

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