新型布尼亚病毒环介导等温扩增可视化检测方法的建立

发布时间：2017-06-03 15:17

  本文关键词：新型布尼亚病毒环介导等温扩增可视化检测方法的建立，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的应用环介导等温扩增(LAMP)技术建立新型布尼亚病毒(SFTSV)可视化快速检测方法。方法针对新型布尼亚病毒的S片段基因设计LAMP引物建立LAMP方法。反应体系内加入染料羟基萘酚蓝(HNB)作为反应扩增指示剂,根据LAMP浊度仪扩增结果优化反应条件,根据HNB颜色变化进行结果判定,评估LAMP方法的特异性和灵敏性。结果建立的LAMP方法最低检出限为10拷贝/反应管;方法的特异性高,仅SFTSV反应管颜色由紫罗兰变为天蓝色,而汉坦病毒、新疆出血热、Q热、马尔堡、埃博拉病毒及阴性对照反应管均未发生变色反应;LAMP反应的最佳温度为63℃,其扩增效率高于常规PCR,试验过程仅需30min。结论建立的可视化SFTSV LAMP检测方法具有特异性强,灵敏性高,实验设备要求简单等优点,可用于SFTSV的快速检测。
【作者单位】： 南京军区疾病预防控制中心;
【关键词】： 新型布尼亚病毒(SFTSV) 可视化检测 环介导等温扩增(LAMP) 羟基萘酚蓝(HNB)
【基金】：国家重大传染病专项课题(No.20013ZX10004-008;2013ZX10001001-004) 全军青年培育项目(No.13QNP051) 江苏省科技支撑计划(社会发展)项目(No.BE2012609)
【分类号】：R373
【正文快照】： ***2009年的“蜱虫叮咬人致死事件”引起社会广泛关注,其病原体最终确定为布尼亚病毒科白蛉病毒属的一种新病毒,命名为发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(severe fever with thrombocytopenia syndromebunyavirus,SFTSV)[1],该病多发生于丘陵地带,主要传播途径为蜱虫叮咬,临床

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本文编号：418515