抗人蔗糖酶卵黄抗体的制备及其稳定性和体外活性研究

发布时间：2017-06-07 02:02

  本文关键词：抗人蔗糖酶卵黄抗体的制备及其稳定性和体外活性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:制备抗人蔗糖酶(Sucrase,SUC)卵黄抗体(egg yolk immunoglobulin Y,Ig Y)并对其稳定性、体外活性进行研究。方法:采用人SUC蛋白为抗原,免疫海兰灰蛋鸡,水稀释和盐析法提取纯化Ig Y;间接ELISA法监测抗体效价变化并评价其稳定性;SDS-PAGE和Western blot分析Ig Y的纯度和特异性;PNPG法测Ig Y对α-葡萄糖苷酶的体外抑制效果。结果:初次免疫10 d后检测到Ig Y,40 d后效价最高达到1∶12 800;提取的Ig Y重链和轻链分别在65 k D和25 k D处,且能够与抗原蛋白特异性结合;29~69℃范围内水浴15 min和p H 4~7之间37℃水浴4 h,抗体效价无变化;胰蛋白酶与胃蛋白酶作用Ig Y2 h,抗体效价降至一半,延长作用时间,Ig Y对胃蛋白酶耐受力较胰蛋白酶耐受力更强;Ig Y对α-葡萄糖苷酶具有一定的抑制作用,呈现剂量相关性,半抑制浓度(IC50)值为0.540 mg/ml。结论:抗人蔗糖酶卵黄抗体(S-Ig Y)的成功制备为后续用于2型糖尿病大鼠模型体内实验研究奠定基础。
【作者单位】： 遵义医学院珠海校区生物工程系;齐齐哈尔医学院病原教研室;
【关键词】： 蔗糖酶 鸡 卵黄抗体 稳定性
【基金】：贵州省科技厅基金项目[黔科合SY字(2012)3091] 2010年遵义医学院青年科研启动基金(F-501)资助
【分类号】：R392
【正文快照】： 1本文受贵州省科技厅基金项目[黔科合SY字(2012)3091]和2010年遵义医学院青年科研启动基金(F-501)资助。2齐齐哈尔医学院病原教研室,齐齐哈尔161000。糖尿病是以高血糖为特征的慢性代谢性疾病。α-葡萄糖苷酶抑制剂是目前临床治疗2型糖尿病(Type 2 diabetes mellitus,T2DM)口

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本文编号：427924