锌指蛋白转录抑制因子145′非翻译区内部核糖体进入位点的活性

发布时间：2017-06-28 19:03

  本文关键词：锌指蛋白转录抑制因子145′非翻译区内部核糖体进入位点的活性，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的检测锌指蛋白转录抑制因子14(positive regulatory domain zinc finger protein 14,PRDM14)5′非翻译区(5′untranslated region,5′UTR)内部核糖体进入位点(internal ribosome entry site,IRES)的活性。方法 PCR扩增PRDM14 5′UTR各截短序列的基因及全长基因,分别插入至双荧光素酶和红绿荧光报告基因中,构建重组质粒p RLPRDM14 S1-FL、p RL-PRDM14 S2-FL、p RL-PRDM14 S3-FL及p G-PRDM 14-R。将各重组质粒分别转染HEK293细胞,检测PRDM14 5′UTR IRES元件的活性、内部剪切位点和自身启动子的活性及影响IRES活性的序列。将重组质粒p RL-FL/5′UTR分别转染HCT-8/WT、Hep-2、Bel7402/WT和NIH3T3细胞,检测各细胞中PRDM14 5′UTR IRES元件的活性。结果 PRDM14 5′UTR具有内部核糖体进入位点元件活性;不具有内部剪切位点和自身启动子活性;PRDM14 5′UTR的活性激活中心位于25~60 nt,活性抑制中心位于60~95 nt;除NIH3T3细胞外,其他细胞均具有IRES活性。结论 PRDM14 5′UTR具有典型的IRES活性,为今后深入研究PRDM14表达的调控机制奠定了基础。
【作者单位】： 江南大学药学院药物设计与分子药理学实验室;
【关键词】： 锌指蛋白转录抑制因子 内部核糖体进入位点 萤火虫荧光素酶 海肾荧光素酶
【基金】：国家自然科学基金(81101667) 江苏省基础研究计划(自然科学基金)资助项目(BK2009-071)
【分类号】：R3416
【正文快照】： 锌指蛋白转录抑制因子(positive regulatory domainzinc finger protein,PRDM)是一个与人类肿瘤形成相关的转录调节因子家族,在细胞分化和恶变过程中发挥重要作用[1]。PRDM14是PRDM家族的成员之一,包含1个PR-domain和6个锌指结构。基因芯片检测表明,PRDM14于特定的未分化的人

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本文编号：494926