溶血磷脂酸通过RhoA-YAP通路调控脂肪干细胞增殖的研究

发布时间：2017-07-06 12:01

  本文关键词：溶血磷脂酸通过RhoA-YAP通路调控脂肪干细胞增殖的研究

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【摘要】：目的探讨溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)调控脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ASCs)增殖的作用及其分子机制。方法分离SD大鼠ASCs,利用LPA对其进行干预,干预时间为1 h,采用Western Blot检测YES相关蛋白(yes associated protein,YAP)、结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达水平。利用免疫荧光检测YAP亚细胞定位,逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测CTGF和Ankrd1的m RNA表达水平。慢病毒转染ASCs,Western Blot检测不同分组YAP蛋白表达。进一步利用流式细胞术和CCK-8法检测不同分组中ASCs增殖情况。最后采用Rho A抑制剂C3干预,免疫荧光检测不同分组中YAP亚细胞定位,Western Blot检测YAP、CTGF和GTP-Rho A的表达情况。结果 LPA能显著促进YAP的表达和在细胞核内的聚集,同时LPA也能够促进YAP靶基因CTGF在蛋白水平的表达。LPA能上调YAP靶基因CTGF和锚蛋白重复域1(ankyrin repeating domain 1,Ankrd1)的m RNA表达水平。慢病毒转染敲除YAP表达后,LPA对YAP的上调作用被明显抑制。细胞周期流式细胞术和CCK-8检测结果显示LPA可显著促进ASCs的增殖,但在sh YAP慢病毒转染特异性敲除YAP后,LPA对ASCs的促增殖能力被明显削弱。Rho A抑制剂C3处理后,LPA对YAP细胞核聚集的促进作用被削弱,同时LPA对YAP、CTGF和GTP-Rho A表达的促进作用也得到了明显抑制。结论 LPA能够通过Rho A-YAP通路调控ASCs的增殖。
【作者单位】： 华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科;
【关键词】： 溶血磷脂酸 脂肪干细胞 Rho A-YAP通路 细胞增殖
【基金】：国家自然科学基金资助项目(81371915)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 间充质干细胞为具有自我更新能力的成体干细胞,其能向中胚层方向(如软骨细胞、成骨细胞和脂肪细胞等)分化[1]。间充质干细胞存在于诸多部位,如骨髓、脂肪、牙髓及滑膜等组织中[2,3]。Zuk等[4]学者最早在脂肪组织中发现间充质干细胞,并将其命名为脂肪干细胞(adipose-derived st

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