Fonsecaea monophora多聚酮合酶基因的扩增及敲除载体的构建

发布时间：2017-07-26 17:38

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【摘要】：目的扩增Fonsecaea monophora中控制黑素合成的多聚酮合酶(polyketide synthases,PKS)基因并测序,构建PKS基因敲除载体。方法扩增PKS基因,根据测序结果设计引物,从Fonsecaea monophora基因组DNA扩增PKS基因5’-同源臂和3’-同源臂,从质粒pBHt1中扩增潮霉素B抗性标记基因(hyg),最后将各片段插入载体PDHt/sk中。结果测序得到5 389bp大小的PKS基因序列,构建了PKS基因的敲除载体,用酶切及测序等方法鉴定载体构建成功。结论成功构建Fonsecaea monophora PKS基因敲除载体,为研究PKS基因及黑素的生物学功能奠定了良好的基础。
【作者单位】： 中山大学孙逸仙纪念医院皮肤科;吉林大学基础医学院病原生物学系吉林大学真菌研究中心·教育部人兽共患病重点实验室;广东省疾病预防控制中心;
【关键词】： Fonsecaea monophora 多聚酮合酶基因 根癌农杆菌 载体构建
【基金】：国家自然科学基金(81571970)
【分类号】：R3416
【正文快照】： [Chin J Mycol,2016,11(2):70-74]黑素是一类常见于微生物和动植物体内的非均质、高分子量、多功能、结构复杂的聚合体,具有带负电荷、疏水、不溶于酸和大部分有机溶剂等特点。黑素是真菌细胞壁的重要成分,具有吸收紫外线、抗氧化、抗溶菌酶、增强病原真菌表面的黏附性,抵御宿

【参考文献】

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【共引文献】

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【二级参考文献】

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本文编号：577602