miR-20b直接靶向3′-UTR负性调节VEGF的表达

发布时间：2017-08-04 04:14

  本文关键词：miR-20b直接靶向3′-UTR负性调节VEGF的表达

  更多相关文章： 血管内皮生长因子 ′-非编码区 miR-b 双荧光素酶报告载体

【摘要】：目的探讨miR-20b是否直接靶向VEGF 3′-非编码区(3′-UTR)而调控其表达。方法采用miRanda软件预测VEGF 3′-UTR是否存在miR-20b的结合位点;使用PCR方法扩增RAW264.7细胞VEGF基因3′-UTR序列,经双酶切后克隆到pmiR-RB-Report~(TM)质粒海肾荧光素酶的下游,得到pmiR-RB-Report TM-VEGF 3′-UTR双荧光素酶重组质粒,使用电泳法和测序法进行验证;将重组质粒或空质粒与miR-20b模拟物或其对照共转染HeLa细胞,24h后检测相应荧光素酶活性。结果 VEGF 3′-UTR存在miR-20b的结合位点;获得了含VEGF 3′-UTR的双荧光素酶报告载体;重组质粒与miR-20b模拟物共转染组HeLa细胞的荧光素酶活性明显低于空质粒转染组(P0.05)。结论成功构建小鼠VEGF基因3′-UTR双荧光素酶报告载体,miR-20b可以直接靶向VEGF 3′-UTR而负性调控其表达。
【作者单位】： 蚌埠医学院第二附属医院检验科;蚌埠医学院免疫学教研室安徽省感染与免疫重点实验室;
【关键词】： 血管内皮生长因子 ′-非编码区 miR-b 双荧光素酶报告载体
【基金】：国家自然科学基金资助项目(No.81273273) 安徽省自然科学基金资助项目(No.1308085MH114)
【分类号】：R363
【正文快照】： 血管内皮生长因子(vascular endothelialgrowth factor,VEGF)在生理性和病理性的血管生成中均起到重要作用,对于血管内皮细胞来说,它是一种分泌性的有丝分裂原,是最具潜能的促血管生成因子[1]。VEGF家族包括VEGF-A、VEGF-B、VEGF-C、VEGF-D、VEGF-E、VEGF-F、PIGF-1和PIGF-12

【相似文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 杜彦艳;单保恩;;报告基因荧光素酶在科研中的应用[J];中华肿瘤防治杂志;2009年09期

2 詹林盛,饶林,彭剑淳,王会中,贾帅争,王全立;HCVIRES介导荧光素酶小鼠体内表达模型的建立[J];中华微生物学和免疫学杂志;2004年03期

3 彭剑淳;高博;王怡;付秋霞;樊炜;周欠欠;贾帅争;詹林盛;;双荧光素酶标记丙型肝炎病毒亚基因组复制子细胞模型的建立[J];军事医学;2013年09期

4 黄仁魏,津田弘之,高月清,李铭权,廖适生,梁锦华,吴祥元;红细胞生成素介导的早期信号传递的研究[J];实验血液学杂志;1996年03期

5 王小红,王升启,管伟,毛秉智;HCV5′NCR转基因细胞HepG2.9706的特性分析[J];病毒学报;2002年01期

6 高晓宁;林季;李永辉;王莉莉;于力;;FLT3基因3′-非翻译区-荧光素酶报告载体的构建及其活性鉴定[J];中国实验血液学杂志;2010年03期

7 杨洁;李占亭;杜德伟;柴青焕;王丽;张惠中;孙脊峰;;缺氧调控报告载体的构建与鉴定[J];第四军医大学学报;2006年07期

8 栾好江,邓洁英,史轶蘩;垂体生长激素的调节激素对人B淋巴母细胞系IM-9中生长激素基因启动子活性的影响[J];中华微生物学和免疫学杂志;2001年05期

9 ;英科学家首次测出活体心脏能量水平[J];生命世界;2006年11期

10 庞智,JulianRFWalters;维生素D_3对报告载体荧光素酶表达的作用[J];营养学报;1999年04期

中国重要会议论文全文数据库 前2条

1 梁红茹;谭业平;顿灿;郭霄峰;;荧光素酶标记狂犬病毒rHEP-luc株的生物学特性研究[A];2010全国狂犬病防控高层论坛论文集[C];2010年

2 陈静;叶平;刘永学;;亚油酸对1型纤溶酶原激活物抑制剂表达的影响及其机制[A];中华医学会心血管病学分会第八次全国心血管病学术会议汇编[C];2006年

中国博士学位论文全文数据库 前3条

1 饶林;特异性靶向IRES的抗丙型肝炎病毒核酸药物及影响IRES功能的因素研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2004年

2 张静;神经元限制性沉默因子对CART基因转录的调控作用及其机制研究[D];中国人民解放军军事医学科学院;2011年

3 龚凤英;细胞因子对垂体人生长激素基因表达的调节及其机理的研究[D];中国协和医科大学;2003年

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 吴德旺;双亲性分子伞的合成表征与穿膜研究[D];厦门大学;2008年

，

本文编号：617687