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木犀草素和圣草酚对人脐带间充质干细胞的氧化保护作用

发布时间:2017-08-05 16:33

  本文关键词:木犀草素和圣草酚对人脐带间充质干细胞的氧化保护作用


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【摘要】:人脐带间充质干细胞(Human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells, human UC-MSCs)是再生医学中理想的种子细胞。MSCs移植后低存活率一直是细胞治疗以及组织工程中的难题。目前认为受损部位的氧化环境影响MSCs的存活,使其老化、凋亡。研究发现多种黄酮类化合物对不同类型的细胞具有氧化保护作用,但黄酮类化合物对UC-MSCs的氧化保护作用以及潜在机理研究甚少。本研究从7种黄酮类化合物中筛选出对UC-MSCs的氧化保护能力较强的木犀草素和圣草酚,并探究其抗氧化作用机理。实验使用木犀草素和圣草酚预处理MSCs,之后添加过氧化氢进行氧化损伤,通过检测UC-MSCs存活率、凋亡、自由基水平、过氧化氢酶(catalase, CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px,GPx),验证两种黄酮类化合物对UC-MSCs的氧化保护作用:研究结果发现木犀草素和圣草酚预处理能明显增加氧化损伤后UC-MSCs的存活率、抑制其凋亡、降低细胞内自由基水平,增强Catalase和GPx的活性。进一步分析木犀草素和圣草酚对UC-MSCs氧化保护作用的分子机制;结果发现木犀草素和圣草酚预处理后明显降低UC-MSCs中促凋亡蛋白caspase-3、Bax的表达,上调抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制p38的磷酸化,促进Akt的磷酸化;显示木犀草素和圣草酚通过调控细胞凋亡的内源性途径和外源性途径从而保护UC-MSCs,为MS抑制氧化损伤引起的凋亡。这些结果Cs移植以及再生医学提供了新的思路。
【关键词】:人脐带间充质干细胞 木犀草素 圣草酚 氧化保护作用
【学位授予单位】:内蒙古大学
【学位级别】:硕士
【学位授予年份】:2015
【分类号】:R329.2
【目录】:
  • 摘要4-6
  • abstract6-10
  • 符号说明10-11
  • 第一章 黄酮类化合物对细胞的氧化保护作用(文献综述)11-18
  • 1. 黄酮类化合物的结构与分类11-12
  • 2. 黄酮类化合物的功能12-16
  • 2.1 抗氧化作用14-15
  • 2.2 抗癌作用15
  • 2.3 抗炎症作用15-16
  • 3. 黄酮类化合物对细胞的氧化保护作用16-17
  • 4. 展望17-18
  • 第二章 木犀草素和圣草酚对人脐带间充质干细胞的氧化保护作用18-44
  • 1. 引言18-19
  • 2. 研究目的及意义19-20
  • 3. 材料与溶液配制20-23
  • 3.1 仪器20
  • 3.2 实验材料20
  • 3.3 实验试剂及耗材20
  • 3.4 常用溶剂配制20-23
  • 4. 实验方法23-28
  • 4.1 人UC-MSCs培养23-24
  • 4.2 氧化应激模型建立24-25
  • 4.3 黄酮类氧化抑制能力的检测25
  • 4.4 木犀草素和圣草酚对间充质干细胞的抗氧化能力检测25-28
  • 5. 结果28-39
  • 5.1 氧化模型建立28-31
  • 5.2 黄酮类化合物抗氧化能力检测31-34
  • 5.3 木犀草素和圣草粉对过氧化氧引起的UC-MSCs氧化损伤的保护作用34-39
  • 6. 讨论39-44
  • 第三章 木犀草素和圣草酚对过氧化氢引起的UC-MSCs氧化损伤保护潜在机制研究44-58
  • 1. 引言44-45
  • 2. 研究目的与意义45-46
  • 3. 实验材料46-48
  • 3.1 仪器46
  • 3.2 溶液配制46-48
  • 4. 实验方法48-50
  • 4.1 蛋白提取48
  • 4.2 蛋白浓度检测48
  • 4.3 蛋白变性保存48
  • 4.4 western blotting48-50
  • 5. 实验结果50-56
  • 5.1 木犀草素和圣草酚预处理对过氧化氢处理的UC-MSCs氧化保护作用的潜在分子机制研究50-56
  • 6. 讨论56-58
  • 结论58-59
  • 参考文献59-67
  • 致谢67-68
  • 攻读硕士学位期间成果68

【共引文献】

中国博士学位论文全文数据库 前4条

1 李伟;人脐带间质干细胞通过巨噬细胞参与修复肾缺血再灌注损伤研究[D];江苏大学;2013年

2 王有为;脐带间充质干细胞临床前安全性研究[D];北京协和医学院;2013年

3 张强;间质干细胞受幽门螺杆菌影响对胃上皮细胞作用及机制[D];江苏大学;2013年

4 邓震;骨髓间充质干细胞通过miR-29c抑制前列腺癌细胞的功能及机制研究[D];第二军医大学;2014年



本文编号:625876

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