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幽门螺杆菌hspA-ureB融合基因在乳酸菌中的表达

发布时间:2017-08-11 16:17

  本文关键词:幽门螺杆菌hspA-ureB融合基因在乳酸菌中的表达


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【摘要】:目的构建融合表达幽门螺杆菌(H.pylori)抗原Ure B与Hsp A的乳酸乳球菌(L.lactis)菌株,为H.pylori感染的疫苗和免疫诊断研究奠定基础。方法从前期构建的hsp A-ure B融合基因克隆菌株E.coli TB1/p MAL-c2x-hsp Aure B中提取质粒,用PCR方法从质粒中扩增hsp A-ure B基因,将扩增产物经限制性酶切后与表达载体p NZ8110连接,用于转化E.coli MC1061菌株,从转化子中提取重组质粒p NZ8110-hsp A-ure B,用电穿孔法将其转入L.lactis NZ3900菌株中,用乳链菌素诱导hsp A-ure B表达,应用PAGE分析表达产物。结果 hsp A-ure B基因的PCR扩增产物长度为2 085 bp,酶切、PCR和测序鉴定结果均显示L.lactis表达系统构建正确,PAGE分析未能确定融合基因表达条带。结论首次以L.lactis为宿主菌成功构建H.pylori 2种抗原的融合表达系统,研究发现对H.pylori口服疫苗和诊断技术发展具有重要意义。
【作者单位】: 郑州大学公共卫生学院流行病与统计学教研室;河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心(新乡医学院);河南省分子医学重点实验室;
【关键词】乳酸乳球菌 热休克蛋白 尿素酶 幽门螺杆菌 融合表达
【基金】:中国博士后科学基金特别资助项目(200801273) 河南省分子诊断与医学检验技术协同创新中心(新乡医学院)资助项目(XTCX-2015-ZD2)
【分类号】:R3416;R392
【正文快照】: 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染可以引起胃炎、消化性溃疡和胃癌等多种疾病[1]。由于基于抗生素的三联疗法不能预防重复感染,且因细菌抗药性升高致疗效下降,因此疫苗研究在H.pylori感染防治中成为研究热点[2-4]。H.pylori感染的免疫诊断因具有简便快捷和损伤较

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本文编号:657058

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