三种不同抗原对小鼠γδT细胞体外扩增的比较

发布时间：2017-08-12 13:38

  本文关键词：三种不同抗原对小鼠γδT细胞体外扩增的比较

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【摘要】：目的比较异戊烯焦磷酸(IPP)、热休克蛋白70(HSP70)和表位肽(EP6)对小鼠脾脏γδT细胞体外扩增的差异。方法 2011年1月—2015年5月于北京协和医院及北京世纪坛医院选取健康雄性SPF级C57 BL/6小鼠32只,分为16组,每组2只。提取并分离小鼠脾脏γδT细胞,分为对照组、IPP组、HSP70组和EP6组,每组再按浓度及干预方式(连续性刺激及单次刺激)的不同进行分组,IPP浓度分为1.25 ng/ml、2.5 ng/ml、5 ng/ml,HSP70浓度分为6.25μg/ml、12.5μg/ml、25μg/ml,EP6浓度分为0.05μg/μl、0.1μg/μl、0.2μg/μl,连续性刺激即每隔2~3日换液50%并补充所换液体中相应的抗原,单次刺激组即不需补充所换液体中的抗原,共培养10 d。检测对照组与不同浓度抗原、不同干预方式在培养的第0天(D0)、第3天(D3)、第7天(D7)和第10天(D10)的γδT细胞比例。结果不同浓度的抗原作用γδT细胞后第3天出现扩增峰值,达峰时抗原由小到大各浓度的增殖百分比分别为:IPP组(5.46%±0.01%、5.23%±0.01%、5.08%±0.08%),HSP70组(7.43%±0.11%、4.48%±0.07%、7.78%±0.07%),EP6组(3.80%±0.10%、6.22%±0.13%、8.42%±0.11%)。达峰时IPP组1.25 ng/ml的扩增效果较2.5ng/ml和5.0 ng/ml明显升高(5.46%±0.01%vs.5.23%±0.01%、5.08%±0.08%,P0.05)。3组γδT细胞的扩增效果不随抗原浓度增加而升高,随堵养时间的延长而降低。浓度不变干预方式不同时,连续性刺激组和单次刺激组均在第3天出现扩增峰值,连续性刺激组第3天的增殖百分比分别为:IPP组6.38%±0.58%、HSP70组4.27%±0.26%、EP6组5.41%±0.11%;单次刺激组第3天的增殖百分比分别为:IPP组3.60%±0.27%、HSP70组4.54%±0.16%、EP6组3.20%±0.11%;达峰时IPP组和EP6组均出现连续性刺激组扩增百分比大于一次性单次刺激组(P0.05)。结论小鼠模型中抗原体外扩增脾脏γδT细胞时,培养后第3天为扩增的达峰时间,且抗原连续性刺激扩增效果优于单次刺激。
【作者单位】： 首都医科大学附属北京世纪坛医院老年医学科;首都医科大学附属北京佑安医院;
【关键词】： 脾脏 γδT细胞 抗原 增殖 异戊烯焦磷酸 热休克蛋白 表位肽 小鼠
【基金】：国家自然科学基金(81201294)
【分类号】：R392
【正文快照】： 细胞和细胞是目前已知的2种主要T淋巴细胞,78T细胞占人类淋巴细胞总数的比例小于10%,7ST细胞识别的抗原分为MHC分子和非MHC分子,其中磷酸类抗原、热休克蛋白、肽类物质属于非MHC限制分子,T细胞作用广泛,主要调节机体的免疫和监视肿瘤的免疫反应等[1]。本研究旨在比较在动物模

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本文编号：661905