恶性疟原虫3D7株AP核酸内切酶的原核表达及多克隆抗体的制备

发布时间：2017-08-16 12:06

  本文关键词：恶性疟原虫3D7株AP核酸内切酶的原核表达及多克隆抗体的制备

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【摘要】：为研究恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)3D7株AP核酸内切酶(AP endonuclease)的功能,通过PCR的方法扩增PF3D7_0305600(292~1 137 bp),构建克隆载体。测序正确后,将该片段插入到pET-28a和p GEX-4T-1,构建重组表达载体p ET-28a-Ae、p GEX-4T-1-Ae。将表达载体转入BL21-Codon Plus表达重组蛋白r-Ae-His和r-Ae-GST,经SDS-PAGE和Western blot鉴定,r-Ae-His免疫家兔制备多克隆抗体,并用ELISA检测抗血清效价,Western blot检测抗体特异性。结果表明:表达的r-Ae-His分子量约为39 ku,r-Ae-GST分子量约为60 ku。制备的多克隆抗体能够特异性地识别天然蛋白,可用于恶性疟原虫3D7株AP核酸内切酶的后续研究。
【作者单位】： 吉林大学人兽共患病研究所;
【关键词】： 恶性疟原虫 AP核酸内切酶 基因克隆 多克隆抗体 药物靶点
【基金】：国家自然科学基金项目(81130033)
【分类号】：R382.31
【正文快照】： 疟原虫(Plasmodium)是一类营寄生生活的单细胞原虫,是疟疾的病原体。世界范围内,疟疾依然是危害人类健康的重大公共卫生问题,每年造成约70万人死亡[1]。引起人体疟疾的5种疟原虫中,以恶性疟原虫(Plasmodium falciparum)造成的危害最为严重[2]。药物治疗作为控制疟疾的重要手段，

本文编号：683175