DMSO联合高糖体外诱导兔骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的研究

发布时间：2017-08-17 03:08

  本文关键词：DMSO联合高糖体外诱导兔骨髓间充质干细胞分化为胰岛样细胞的研究

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【摘要】：该研究旨在探索二甲基亚砜(dimethyl sulphoxide,DMSO)联合高糖体外诱导日本大耳白兔(Lepus brachyurus)骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)分化为胰岛样细胞的可行性及其调控机制。采用不含血清的DMSO联合高糖诱导P3代兔BMSCs分化为胰岛样细胞。倒置显微镜下观察细胞的形态变化;双硫腙染色和免疫荧光染色检测细胞分化;RTq PCR检测胰岛细胞相关基因[Foxa2(forkhead box A2)、Nestin(neuroepithelial stem cell protein)、Pax6(paired box gene 6)、Pdx-1(pancreatic duodenal homeobox-1)、胰岛素]的表达,并以诱导培养前(0 d)细胞、兔骨髓细胞、P3代BMSCs和胰腺组织中胰岛细胞相关基因表达情况作为参照。结果表明,Foxa2、Nestin和Pax6基因不能作为兔BMSCs向胰岛样细胞诱导分化成功的标志基因。DMSO能够激活Pdx-1基因的表达,促进兔BMSCs分化为可分泌胰岛素的胰岛前体细胞。高糖能够促进兔BMSCs分化为胰岛样细胞,并可显著促进Pdx-1和Foxa2基因的表达。
【作者单位】： 河南农业大学牧医工程学院;
【关键词】： 兔 骨髓间充质干细胞 二甲基亚砜 高糖 分化 胰岛样细胞
【基金】：国家高新技术研究发展计划(863计划)(批准号:2008AA101010) 河南省基础与前沿技术研究计划基金(批准号:092300410081)资助的课题~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 1材料与方法1.1实验动物1月龄雄性日本大耳白兔5只(购自河南省实验动物中心)。1.2主要试剂胎牛血清购自浙江天杭生物科技有限公司。DMEM/F12干粉培养基、H-DMEM培养液购自Gibco公司。DMSO、4%多聚甲醛、Triton X-100、正常山羊血清、DAPI染核剂、抗荧光衰减淬灭剂购自Solarbio

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1 柴三葆;杨金奎;;骨髓间充质干细胞转化为胰岛样细胞的研究进展[J];国外医学.内分泌学分册;2005年S1期

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本文编号：686806