重叠延伸PCR法构建华支睾吸虫磷酸甘油酸变位酶突变体CsPGM-H190Q

发布时间：2017-08-23 03:05

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【摘要】：为了研究华支睾吸虫磷酸甘油酸变位酶的活性位点,试验通过生物信息学分析和重叠延伸PCR的方法,对该酶的底物结合位点进行突变,得到突变体基因CsP GM-H190Q,将其克隆至表达载体pET-24b(+)上,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,利用IPTG进行诱导表达。结果表明:华支睾吸虫磷酸甘油酸变位酶突变体蛋白(CsP GM-H190Q)的分子质量为29.0 ku,Ni-NTA HisTrap柱纯化后得到纯度较高的蛋白。
【作者单位】： 山东理工大学生命科学学院;
【关键词】： 重叠延伸PCR 华支睾吸虫 磷酸甘油酸变位酶 突变体 HQ 纯化
【基金】：山东省自然科学基金项目(ZR2011HM065)
【分类号】：R383.2
【正文快照】： 华支睾吸虫是一种重要的吸虫类寄生虫,寄生在 人或其他宿主的肝胆管内,可破坏胆管和肝脏组织,引起肝吸虫病[1]。为更好地研究华支睾吸虫一些重要蛋白的功能,从中克隆了磷酸甘油酸变位酶(CsP GM)基因并进行了初步分析[2]。该基因编码的蛋白含有256个氨基酸,为进一步确定该酶的，

本文编号：722586