BMP9诱导人脐带间充质干细胞体内外成骨分化的作用研究

发布时间：2017-08-26 07:11

  本文关键词：BMP9诱导人脐带间充质干细胞体内外成骨分化的作用研究

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【摘要】：目的:探讨人骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic proteins 9,BMP9)在体内外诱导人脐带间充质干细胞(human umbilical cord-derived mesenchymal stem cells,h UC-MSCs)成骨分化的作用研究。方法:设立Ad-BMP9处理组和Ad-GFP对照组感染h UC-MSCs,两组细胞分别于3天、5天、7天进行ALP活性检测,14天后采用免疫组织化学染色检测骨钙素(Osteocalcin,OCN)、骨桥蛋白(Osteopotin,OPN)的表达情况,21天后茜素红染色检测矿化结节的形成;然后收集不同分组h UCMSC用于裸鼠皮下注射成骨模型的建立,4周后取出离体骨进行Micro-CT扫描和分析,并进行HE、Masson Trichrome、Alcain Blue染色。结果:BMP9处理组的ALP活性和矿化结节形成明显高于对照组,免疫组化染色结果显示BMP9诱导组的OCN、OPG的阳性表达明显高于对照组;裸鼠皮下注射成骨模型的观察结果显示,空白对照组没有形成肉眼可见的皮下包块,仅感染AdBMP9的h UC-MSCs能生成异位骨,且形成的异位骨骨量明显,骨密度平均值为396.05±0.60;HE染色结果显示BMP9诱导生成的异位骨中形成部分成熟的骨基质和骨小梁,Masson Trichrome染色结果显示BMP9明显诱导h UC-MSCs的基质矿化作用,Alcain Blue染色结果显示BMP9明显诱导h UC-MSCs的软骨内成骨作用。结论:BMP9成功诱导人脐带间充质干细胞的体内外成骨作用,为临床骨组织工程的细胞疗法提供了明确的可行性。
【作者单位】： 重庆医科大学附属儿童医院儿童发育疾病研究教育部重点实验室儿科学重庆市重点实验室重庆市干细胞治疗工程技术研究中心;重庆医科大学附属儿童医院骨科;重庆医疗器械质量检验中心;
【关键词】： 骨形态形成蛋白 人脐带间充质干细胞 成骨分化
【基金】：重庆市科委自然科学研究资助项目(cstc2013jcyjA10014)
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 骨损伤尤其是骨折是临床的常见病、多发病,给患者带来极大痛苦,因此如何加快骨折愈合、防治骨不连是目前迫切需要解决的问题。人脐带间充质干细胞具有取材方便、对供体无伤害、无伦理学争议、相对纯净及免疫原性更低[1]等优点,我们选择其作为临床治疗骨缺损疾病的理想种子细胞

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本文编号：740378