降钙素基因相关肽通过Hippo通路调控小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

发布时间：2017-08-26 12:18

  本文关键词：降钙素基因相关肽通过Hippo通路调控小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

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【摘要】：目的前期研究发现降钙素基因相关肽(CGRP)能够促进成骨细胞的生物学活性,为了进一步揭示CGRP在骨修复中的作用,检测CGRP对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨分化的影响,并对Hippo通路在这个过程中的作用进行了初步探讨。方法在体外诱导培养的BMSCs中加入不同浓度的CGRP,处理48 h后测试碱性磷酸酶(ALP)活性,以筛选的优势浓度;处理7 d后进行茜素红染色,分别检测细胞的分化情况。应用Western blot检测CGRP作用于BMSCs后,Hippo通路核心分子Mst1/2蛋白磷酸化的表达水平;利用Hippo通路抑制剂维替泊芬(Verteporfin)阻断下游Yap信号,逆转录聚合酶链反应检测其对成骨相关因子Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、Runt相关转录因子2(Runx2)mRNA的表达影响。结果 ALP活性检测结果显示,与空白对照组相比,10~(-9)、10~(-8)、10~(-7) mol·L~(-1)浓度范围的CGRP都能显著促进小鼠ALP活性的增加(P0.05),以10~(-8) mol·L~(-1)浓度的CGRP为最佳刺激浓度。用10~(-8) mol·L~(-1)浓度的CGRP处理后,茜素红染色显示钙化结节明显增多。CGRP能够显著上调p-Mst1/2蛋白的表达(P0.05);当运用了抑制剂Verteporfin时,显著降低了CGRP诱导的Runx2、ColⅠmRNA的表达(P0.05)。结论 CGRP能够促进小鼠BMSCs的成骨分化,且Hippo信号通路介导了CGRP作用于小鼠BMSCs成骨分化的过程。
【作者单位】： 第三军医大学新桥医院口腔科;
【关键词】： 降钙素基因相关肽 骨髓间充质干细胞 Hippo信号通路
【基金】：国家自然科学基金(81371110;81300873)~~
【分类号】：R329.2
【正文快照】： 降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related pep-tide,CGRP)在骨发育、骨代谢、骨修复以及种植体周围的骨重建中都具有重要的病理生理学意义。本课题组在前期的实验中发现,CGRP能显著促进体外培养的人MG-63成骨细胞样细胞和鼠成骨细胞的增殖和分化,并且探究了MG-63细胞蛋白质

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本文编号：741458