体外高通量评价过敏反应模型的建立及其对潜在过敏原异莲心碱的评价研究

发布时间：2017-08-27 05:44

  本文关键词：体外高通量评价过敏反应模型的建立及其对潜在过敏原异莲心碱的评价研究

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【摘要】：目的建立体外高通量评价过敏反应模型,并对中药单体化合物进行筛选,从而确定其中的潜在过敏原。方法建立稳定表达MrgX2的高通量药物筛选细胞模型。首先将重组质粒pm Cherry-C1-MrgX2转染人胚肾HEK293细胞,通过G418筛选建立稳定表达人MrgX2的细胞株;再通过MrgX2特异性激动剂C48/80和拮抗剂2-APB检测细胞株的功能和稳定性,以Z因子确认高通量体系的稳定性和可靠性。采用上述模型对180个单体化合物进行筛选,以EC_(50)、IC_(50)、特异性及毒性确定该激动剂的功能性。结果 MrgX2细胞模型对特异性激动剂C48/80和特异性拮抗剂2-APB的EC_(50)和IC_(50)分别为2.7μg/m L和46.29μmol/L,MrgX2细胞模型第1代和第20代对激动剂的反应基本一致,该模型Z因子为0.78。筛选得到异莲心碱为阳性激动剂,其功能验证结果为:EC_(50)为4.5μmol/L、IC_(50)为39.47μmol/L,只能特异性激动MrgX2受体,且无细胞毒性。结论采用钙流方法可成功构建基于过表达细胞系HEK293/MrgX2的体外高通量评价过敏反应模型,并且初步确定异莲心碱为潜在引发过敏反应的过敏原。
【作者单位】： 北京中医药大学中药学院;中国科学院北京基因组研究所;
【关键词】： MrgX 过敏反应评价方法 高通量 钙流检测 异莲心碱
【基金】：北京市科技新星计划交叉学科项目(xxhz201210)
【分类号】：R285.5;R-332
【正文快照】： 随着中药临床应用的日益增长,中药安全性“事件”时有发生[1],尤其中药注射剂的临床安全性问题倍受关注[2]。目前过敏反应评价方法分为体内法和体外法。体内法存在主观性强、周期偏长、不适合大规模药物筛选等缺点[3];体外法通常具有假阳性率高、人鼠种群的差异性等缺点[4]。

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1 王辉,孙春艳,刘刚;异莲心碱的体外抗氧化活性[J];中国生化药物杂志;2005年01期

2 陆曙;张志斌;龚少愚;苏伟;朱红俊;;异莲心碱防止高血压大鼠左室肥厚的可能机制[J];中华高血压杂志;2008年01期

3 张帆,王嘉陵,钱家庆;异莲心碱对麻醉大鼠血流动力学及平滑肌收缩反应的影响[J];中国药理学与毒理学杂志;2000年04期

4 汤国想;赵立波;王晓敏;张韶辉;王嘉陵;;异莲心碱对百草枯诱导的小鼠急性肺损伤及肺纤维化的保护作用(英文)[J];中国药理学与毒理学杂志;2007年06期

5 陈俊萍;李向阳;;异莲心碱在大鼠体内的药动学研究[J];中国药房;2011年23期

6 张帆,王嘉陵,钱家庆;异莲心碱抗实验性心律失常作用及对豚鼠心肌动作电位的影响[J];中草药;2000年10期

7 肖军花,张延琳,丁丽丽,冯秀玲,王嘉陵;异莲心碱对苯肾上腺素诱导猪冠脉平滑肌细胞增殖的影响(英文)[J];药学学报;2005年02期

8 陈灵骏;罗顺德;;异莲心碱抗血小板聚集和抗凝血作用[J];中国医院药学杂志;2011年15期

9 刘斯灵;郝亚荣;秦健;余莉;;异莲心碱对D-半乳糖致衰老小鼠抗氧化作用的研究[J];中国医药导报;2011年20期

10 冯秀玲,喻欣,肖军花,王嘉陵;异莲心碱对心血管功能及压力超负荷型左心室肥大的作用[J];华中科技大学学报(医学版);2002年06期

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1 陆曙;龚少愚;张志斌;苏伟;;异莲心碱对高血压大鼠左室肥厚及心肌肌浆网钙泵活力的影响[A];第九次全国中医心病学术研讨会论文精选[C];2007年

2 肖军花;丁丽丽;王嘉陵;;异莲心碱抑制血管紧张素Ⅱ诱导猪冠脉平滑肌细胞增殖及机制[A];第八届全国生化药理学术讨论会暨第七届Servier奖颁奖大会会议摘要集[C];2003年

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1 南李;山核桃蒲壳中生物碱的分离及异莲心碱对大鼠肝微粒体CYP3A酶活性的影响[D];浙江大学;2012年

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本文编号：744660