定坤丹对大、小鼠前列腺增生模型的影响

发布时间：2017-09-04 17:39

  本文关键词：定坤丹对大、小鼠前列腺增生模型的影响

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【摘要】：目的:探究定坤丹对大鼠、小鼠前列腺增生的影响作用。通过对实验动物前列腺重量的测定,计算实验动物的前列腺脏器指数,检测模型大、小鼠血清中雌激素——雌二醇及雄激素——双氢睾酮、睾酮含量,检测实验大鼠前列腺组织匀浆中前列腺酸性磷酸酶活力,观察碱性成纤维细胞生长因子、转化生长因子及其m RNA、细胞凋亡基因Bax、Bcl-2等生长因子在前列腺组织中的表达,从病理学角度观察并描述前列腺、肾脏等脏器的微观改变,基于这些指标的变化,综合性讨论定坤丹对男性常见疾病——前列腺增生的影响作用。方法:小鼠模型的复制:造模小鼠皮下注射丙酸睾酮5mg/kg,每日1次,连续3周,造前列腺增生模型,同时,每日1次,连续给药3周,各组给予相应药物,用等量的溶媒灌服给予模型及空白对照组,非那雄胺片组给予非那雄胺混悬液(1.25mg/kg),癃闭舒胶囊组给予癃闭舒胶囊混悬液(450mg/kg),大、中、小定坤丹剂量组分别给予大、中、小剂量(10.8g/kg、5.4g/kg、2.7g/kg)的定坤丹混悬液。于末次给药后2h,小鼠眼眶取血,分离血清,按照试剂盒说明书测血清中T、DHT、E2水平;取前列腺、附睾、肾等组织,称重,并计算相关脏器指数;光镜下观察前列腺、附睾等脏器的组织形态变化。大鼠模型的复制:摘除大鼠两边睾丸以去势,待一周大鼠自然恢复后,大鼠给予丙酸睾酮注射液(4mg/kg),每日1次,连续30d,造前列腺增生模型。模型复制成功后各组给予相应药物,每日1次,连续给药30d:把等量溶媒给予模型及空白对照组,非那雄胺片组给予0.83mg/kg的非那雄胺混悬液,癃闭舒胶囊组给予300mg/kg的癃闭舒胶囊混悬液,大、中、小定坤丹剂量组分别给予大、中、小剂量(7.2g/kg、3.6g/kg、1.8g/kg)的定坤丹混悬液。于末次给药后2h,眼眶取血,离心,分离血清,按照试剂盒说明书测血清中T、DHT、E2水平;计算前列腺指数;测定前列腺组织匀浆中PACP、NOS、SOD、MDA水平,光镜下观察各组前列腺等脏器的形态变化,观察前列腺组织中b FGF、TGF-β1、EGF、IGF-Ⅰ、细胞凋亡基因Bax、Bcl-2及Ki67的免疫组化表达情况。结果:丙酸睾酮法诱导非去势小鼠前列腺增生模型成功,大、中、小剂量定坤丹组显著降低小鼠前列腺脏器指数;显著降低小鼠血清中T、DHT含量,E2含量显著或明显升高;显著改善小鼠前列腺增生病理变化。丙酸睾酮法诱导去势大鼠前列腺增生模型成功,大、中、小剂量定坤丹组显著降低大鼠前列腺脏器指数;显著降低大鼠血清中T、DHT含量,E2含量显著或明显升高;大、中、小剂量定坤丹组均可显著降低模型大鼠前列腺中的PACP活力,显著升高TNOS、i NOS水平、TGF-β平均光密度,显著或明显降低大鼠前列腺MDA水平、b FGF、EGF、Bcl-2、Ki-67平均光密度、b FGF m RNA表达,显著或明显升高大鼠前列腺SOD活力、Bax平均光密度、TGF-βm RNA表达。大、中剂量定坤丹组可显著或明显降低模型大鼠前列腺中IGF-I平均光密度,小剂量定坤丹组有降低IGF-I平均光密度的趋势;显著改善小、大鼠前列腺增生病理变化。结论:定坤丹可改善动物模型机体激素内分泌紊乱情况,增强动物模型的抗氧化能力,调节模型动物前列腺细胞凋亡/增殖平衡,说明定坤丹对前列腺增生具有较好的治疗作用。
【关键词】：定坤丹 前列腺增生 双氢睾酮(DHT) 睾酮(T) 前列腺酸性酶(PACP)
【学位授予单位】：河南中医药大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R285.5;R-332
【目录】：

• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 中英文对照表11-12
• 前言12-14
• 实验1 定坤丹对丙酸睾酮诱导小鼠前列腺增生模型的影响14-26
• 1 实验材料14-15
• 1.1 实验药物和试剂14
• 1.2 实验仪器14
• 1.3 实验动物14-15
• 2 实验方法15-16
• 2.1 实验分组15
• 2.2 造模方法与给药15
• 2.3 指标的测定15-16
• 2.4 试剂盒测定方法16
• 3 统计学处理方法16
• 4 实验结果16-25
• 4.1 对丙酸睾酮诱导BPH模型小鼠前列腺湿重和前列腺指数影响16-18
• 4.2 对丙酸睾酮诱导BPH模型小鼠血清中T、DHT、E_2水平影响18-20
• 4.3 实验各组小鼠脏器病理组织学观察20-25
• 5 小结25-26
• 实验2 定坤丹对丙酸睾酮诱导大鼠前列腺增生模型的影响26-50
• 1 实验材料26-27
• 1.1 实验药物和试剂26-27
• 1.2 实验仪器27
• 1.3 实验动物27
• 2 实验方法27-31
• 2.1 实验分组27
• 2.2 造模方法与给药27-28
• 2.3 指标的测定28
• 2.4 试剂盒测定方法28-31
• 3 统计学处理方法31
• 4 实验结果31-48
• 4.1 对丙酸睾酮诱导BPH模型大鼠前列腺湿重和前列腺指数影响31-32
• 4.2 对丙酸睾酮诱导BPH模型大鼠血清E_2、T、DHT水平影响32-34
• 4.3 对丙酸睾酮诱导BPH模型大鼠前列腺中PACP活力影响34-35
• 4.4 对丙酸睾酮诱导BPH模型大鼠前列腺中NOS活力的影响35-36
• 4.5 对丙酸睾酮诱导BPH模型大鼠前列腺中MDA含量水平影响36-37
• 4.6 对丙酸睾酮诱导BPH模型大鼠前列腺中SOD活力的影响37-38
• 4.7 对丙酸睾酮诱导BPH大鼠模型前列腺中生长因子平均光密度的影响38-40
• 4.8 对丙酸睾酮诱导BPH大鼠模型前列腺中Bax、Bcl-2 平均光密度的影响40-41
• 4.9 对丙酸睾酮诱导BPH大鼠模型前列腺中Ki-67 平均光密度的影响41-42
• 4.10 对丙酸睾酮诱导BPH模型大鼠前列腺中b FGF、TGF-βm RNA表达的影响42-44
• 4.11 病理组织学观察BPH模型大鼠前列腺、胸腺、脾脏、附睾、肾脏44-48
• 5 小结48-50
• 讨论50-58
• 1 现代医学对前列腺增生的认识50-52
• 1.1 对前列腺增生发病机制的认识50-52
• 1.1.1 生长因子学说与 BPH 的关系50
• 1.1.2 激素内分泌学说与BPH的关系50-51
• 1.1.3 细胞凋亡学说与BPH的关系51
• 1.1.4 氧化应激与BPH的关系51
• 1.1.5 间质-上皮细胞相互作用与BPH的关系51-52
• 1.2 前列腺增生的治疗52
• 1.2.1 药物治疗52
• 1.2.2 手术治疗52
• 2 中医学对前列腺增生的认识52-53
• 2.1 中医对BPH病因病机52-53
• 2.2 前列腺疾病的中医药治疗53
• 3 定坤丹治疗前列腺增生的前期研究53
• 4 丙酸睾酮诱导小、大鼠BPH模型53-54
• 5 定坤丹对前列腺增生动物模型结果与作用机理的探讨54-58
• 5.1 对前列腺腺体增生的影响54
• 5.2 对大、小鼠前列腺增生模型雌、雄激素水平以及腺酸性磷酸酶的影响54-55
• 5.3 对大鼠前列腺中TNOS、iNOS水平的影响55
• 5.4 对大鼠前列腺中MDA水平以及SOD活力的影响55
• 5.5 对大鼠前列腺中bFGF、TGF-β、EGF、IGF-I平均光密度的影响55
• 5.6 对大鼠前列腺中Bax、Bcl-2、Ki-67 平均光密度的影响55-56
• 5.7 对大鼠前列腺中b FGF、TGF-β mRNA表达的影响56
• 5.8 对模型大、小鼠各脏器的病理组织学观察以及定量分析结果56-58
• 结论58-60
• 致谢60-61
• 参考文献61-65
• 附录65-111
• 附录1 病理照片65-101
• 附录2 文献综述101-110
• 参考文献108-110
• 附录3 在校期间论文论著和科研情况110-111

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