华支睾吸虫parkin蛋白的分子生物学特征研究

发布时间：2017-09-10 04:43

  本文关键词：华支睾吸虫parkin蛋白的分子生物学特征研究

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【摘要】：目的了解华支睾吸虫Parkin蛋白(Clonorchis sinensis Parkin)的生物学特性。方法从华支睾吸虫cDNA文库获得Parkin的cDNA全长,NCBI搜索与之相似度高的基因序列,预测其所含结构域和功能;应用MEGA5程序对来自GenBank中与之有较高相似度的基因序列进行分析,构建基因进化树;原核表达重组融合蛋白CsParkin,纯化后免疫Blab/c小鼠,获得多克隆抗体,采用Western blot鉴定天然CsParkin;采用qRT-PCR测定CsParkin基因在不同发育阶段的表达水平。结果 CsParkin蛋白含有5个结构域,分别是Ubl、RING0、RING1、IBR和RING2,具有典型的Parkin蛋白结构;该蛋白与人及各种动物的Parkin有很高的相似度,与其他吸虫有更近的进化关系;Western blot显示原核表达的重组CsParkin,与天然CsParkin分子质量相同,均为45.7ku;CsParkin在囊蚴中的表达量高于成虫;免疫组化显示CsParkin主要分布于成虫受精囊中的精子及口吸盘和睾丸,在囊蚴中广泛分布。结论肝吸虫CsParkin属蛋白于保守蛋白,具有典型的泛素连接酶3的功能结构,推测其在蛋白的泛素化中起到作用,可能在华支睾吸虫的生长过程中发挥作用。
【作者单位】： 滨州医学院病原生物学教研室;
【关键词】： 华支睾吸虫 Parkin 泛素连接酶
【基金】：烟台市科技计划项目(No.2015ZH084)
【分类号】：R383.22
【正文快照】： *?**?华支睾吸虫是一种食源性寄生虫,引起华支睾吸虫病,主要流行于中国、韩国和越南北部,造成约3500万人感染[1]。华支睾吸虫为雌雄同体,成虫寄生于食鱼类哺乳动物的肝胆管内。囊蚴为感染期,广泛存在于流行区的淡水鱼体内。当哺乳动物生食或食用不熟的鱼肉时,囊蚴经过胃部到达

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本文编号：824811