人源类溶菌酶蛋白6在男性生殖系统中的表达

发布时间：2017-09-11 07:05

  本文关键词：人源类溶菌酶蛋白6在男性生殖系统中的表达

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【摘要】：目的:检测人源类溶菌酶蛋白6(LYZL6)在男性生殖系统中的表达情况,以揭示其可能的生理功能。方法:将整合LYZL6编码基因的毕赤酵母菌株进行高密度培养,甲醇诱导表达后甲壳素亲和色谱纯化。采用双层琼脂平板扩散法观察重组LYZL6的杀菌活性。以纯化的重组蛋白为免疫原制备兔抗LYZL6多克隆抗体,ELISA检测抗体效价。通过Western印迹检测LYZL6蛋白在人各组织及精液中的分布,并采用免疫组化法确认LYZL6在人睾丸中的表达情况。结果:在低p H条件下重组LYZL6对溶壁微球菌杀菌活性较高。以重组LYZL6为免疫原制备的抗体具有高效价,Western印迹检测表明LYZL6仅在睾丸和附睾中表达,且睾丸表达水平较高。在人精子蛋白提取物中检测到了LYZL6,精浆中并未检测到明显蛋白条带。免疫组化检测显示在睾丸组织中,LYZL6定位于晚期精母细胞及圆形精子细胞。结论:在低p H条件下,重组LYZL6具有较强的溶解细菌细胞壁的能力;LYZL6被睾丸上皮分泌后结合于精子上,提示LYZL6有可能在精卵融合过程的某个环节发挥作用。
【作者单位】： 上海健康医学院基础医学院;上海纽约大学文理学部;上海健康医学院药学院;复旦大学遗传工程国家重点实验室;
【关键词】： 人源类溶菌酶蛋白 毕赤酵母 真核表达 杀菌活性 多克隆抗体 睾丸 精子
【基金】：上海市自然科学基金(15ZR1421800)~~
【分类号】：R339.21
【正文快照】： ，

本文编号：829278