针刺对脑缺血再灌注模型大鼠的保护作用与基底动脉TREK-1表达的相关性研究

发布时间：2017-09-14 22:24

  本文关键词：针刺对脑缺血再灌注模型大鼠的保护作用与基底动脉TREK-1表达的相关性研究

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【摘要】：目的：研究针刺对脑缺血再灌注大鼠的保护作用及时效性和其与基底动脉TREK-1表达的相关性。方法：1、采用改良线栓法制备大鼠脑急性局部缺血再灌注模型,随机分为针刺组(AG)和模型组(MG),另设假手术组(SG)和正常组(B)。AG组针刺“醒脑开窍法”主穴内关、水沟,其它各组不针刺。观察针刺1、3、5、7天的效应。用总死亡率和早期死亡率、Garcia JH神经功能评分、脑微循环灌注量、脑梗死体积评价针刺对缺血再灌注模型大鼠的保护作用。卡方检验比较模型组与针刺组间死亡率；析因方差分析针刺因素与时间因素的效应。2、采用HE染色法观察大鼠脑缺血再灌注后基底动脉病理组织学改变；免疫组织化学染色检测基底动脉TREK-1的分布；蛋白免疫印迹检测大鼠基底动脉上TREK-1表达量。用单因素方差分析方法或t检验统计再灌注后1、3、7天,针刺组与模型组之间TREK-1表达的差异。结果：1、AG组和MG组之间总死亡率差异没有统计学意义(P0.05),但AG组的早期死亡率明显低于MG组,其差异有统计学意义(P0.05)；AG组神经功能评分和微循环灌注量较MG组高、脑梗死体积较MG组低,差异均有统计学意义(P0.01)。针刺因素和时间因素的效应均有统计学意义(P0.01),在针刺3天和5天之间针刺因素的效应最明显；另外,针刺因素与时间因素对脑微循环灌注的交互作用也有统计学意义(P0.01)。2、针刺对脑缺血再灌注基底动脉血管结构和细胞形态无影响；基底动脉平滑肌细胞和内皮细胞上均有TREK-1的表达,缺血再灌注后TREK-1表达先增加后下降,针刺可减少这种变化趋势。针刺1、3、7天AG组TREK-1表达较MG组低,两组差异有统计学意义(P0.01), AG、MG组与SG、B组之间大鼠基底动脉上TREK-1的表达差异有统计学意义(P0.01),AG、MG组表达增多。结论：1、针刺内关、水沟穴有减轻和修复急性局部脑缺血再灌注模型大鼠脑损伤的作用,且这种作用有一定的时效性。2、针刺可减少大鼠脑缺血再灌注后基底动脉TREK-1的表达,针刺疗法的作用机制可能与机械敏感型钾离子通道相关。
【关键词】：醒脑开窍法 TREK-1 缺血再灌注 神经功能评分 微循环灌注
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R245;R-332
【目录】：

• 中文摘要3-5
• Abstract5-7
• 英文缩略词7-10
• 研究背景10-13
• 第一章 针刺对脑缺血再灌注大鼠的保护作用及其时效性观察13-22
• 1.1 实验材料13-14
• 1.1.1 实验动物13
• 1.1.2 主要仪器13
• 1.1.3 主要试剂13
• 1.1.4 自配溶液13-14
• 1.2 实验方法14-16
• 1.2.1 模型制备和成功与否判断标准14
• 1.2.2 动物分组14
• 1.2.3 针刺方法14-15
• 1.2.4 死亡率统计15
• 1.2.5 Garcia JH神经功能评分方法15
• 1.2.6 脑局部微循环灌注量测定15-16
• 1.2.7 脑梗死体积测量16
• 1.2.8 统计方法16
• 1.3 实验结果16-20
• 1.3.1 早期死亡率和总死亡率16
• 1.3.2 Garcia JH神经功能评分结果16-18
• 1.3.3 针刺对脑缺血再灌注模型大鼠脑微循环灌注的影响18-19
• 1.3.4 针刺对脑缺血再灌注模型大鼠脑梗死体积百分比的影响19-20
• 1.4 讨论20-22
• 第二章 针刺对脑缺血再灌注大鼠基底动脉TREK-1表达的影响22-39
• 2.1 实验材料22-26
• 2.1.1 实验动物22
• 2.1.2 主要仪器22-23
• 2.1.3 主要试剂23
• 2.1.4 自配溶液23-26
• 2.2 实验方法26-31
• 2.2.1 石蜡切片制备26
• 2.2.2 HE染色观察基底动脉改变26-27
• 2.2.3 HIC-P染色观察基底动脉上TREK-1的分布27
• 2.2.4 蛋白免疫印迹检测基底动脉TREK-1的表达27-31
• 2.2.5 统计方法31
• 2.3 实验结果31-36
• 2.3.1 基底动脉HE染色结果31-32
• 2.3.2 基底动脉上TREK-1免疫组化结果32-33
• 2.3.3 蛋白浓度标准曲线及待测样品蛋白浓度33-34
• 2.3.4 电泳凝胶考马斯亮蓝染色结果34
• 2.3.5 基底动脉上TREK-1蛋白免疫印迹结果34-36
• 2.4 讨论36-39
• 结论39-40
• 综述40-49
• 参考文献49-56
• 在学期间的科研成果56-57
• 致谢57

【参考文献】

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本文编号：852700