新型超顺磁性氧化铁标记SD大鼠脂肪干细胞的有效性及安全性研究
发布时间:2017-09-15 01:26
本文关键词:新型超顺磁性氧化铁标记SD大鼠脂肪干细胞的有效性及安全性研究
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【摘要】:目的:采用新型超顺磁性氧化铁对SD大鼠来源的脂肪干细胞(ADSCs)进行标记,并与既往商用SPIO标记效果进行对比,探讨这种新型超顺磁性氧化铁标记的有效性及安全性。方法:分离、纯化、鉴定SD大鼠来源的ADSCs,然后分不同浓度组(0、6、12、25、50和100μg/mL)和时间组(6、12、24和48h)进行标记,通过普鲁士蓝染色测定铁标记率;在不影响细胞形态的前提下,对达到95%以上铁染色率的孵育浓度、时间进行标记安全性检测,包括活力、增殖力、细胞表面抗原表达;采用透射电子显微镜观察标记细胞的超微结构,采用ICP-AES对标记细胞内的铁含量进行测定,并与商用SPIO标记效果进行对比。结果:在无细胞毒性的前提下,新型SPIO达到95%以上铁染色率的孵育浓度是12和25μg/mL,孵育时间是12h;ICP-AES检测显示具有表面正电荷的聚乙二醇(PEG)/聚乙烯亚胺(PEI)修饰的SPIO标记后细胞内的铁含量达到35.4pg/cell(25μg/mL中孵育12h后)和20.16pg/cell(12μg/mL中孵育12h后),并随着孵育浓度的增加,细胞内的铁含量增加;而具有表面零电荷的PEG/聚乙烯吡咯烷酮(PVP)修饰的SPIO标记后的铁含量仅为6.96pg/cell(25μg/mL中孵育12h后);透射电子显微镜显示标记后细胞器结构完整,内吸收的SPIO主要位于细胞质内的囊泡和溶酶体中。结论:新型SPIO在适当孵育浓度和时间下可以安全、快速标记ADSCs;PEG/PEI修饰的SPIO标记效果要远远比既往商用的SPIO快速有效,可作为一种优势的新型磁性标记物用于干细胞标记;而PEG/PVP修饰的SPIO比起既往商用的SPIO并无明显优势,说明表面电荷在细胞标记中占有极其重要的角色。
【作者单位】: 广州医科大学附属广州市第一人民医院/广州市南沙中心医院医学影像部;惠州市中心人民医院放射科;
【关键词】: 新型超顺磁性氧化铁 脂肪干细胞 染色与标记 铁含量 表面电荷
【基金】:2014广州市南沙区经贸科技与信息化局民生科技项目基金(2014MS01) 2014广州市医药卫生科技一般引导项目(20141A010015) 2015广州市科技计划项目科学专项(一般项目)基金(1563000424) 2015广东省科技计划项目技术开发类基金(2014A020212034)
【分类号】:R318.08;R329.2
【正文快照】: 由于磁性氧化铁纳米材料具有良好的磁导向性、生物相容性以及生物降解性等特点,因而被广泛用于干细胞标记领域[1-2]。目前干细胞示踪成像的磁性氧化铁纳米材料主要采用商用的Resovist、Feridex等,但它们都是由化学共沉淀方法制备的,普遍存在粒径不均匀、容易团聚的缺点,性能有
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