人IL-37b基因真核表达载体的构建与表达

发布时间：2017-09-15 17:41

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【摘要】：目的构建p EGFP-N1/IL-37b真核表达载体,并检测其在THP-1细胞中的表达情况。方法从人PBMCs中提取总RNA,利用RT-qPCR技术扩增出IL-37b基因编码区序列,克隆至p EGFP-N1真核表达载体,将构建的重组质粒p EGFP-N1/IL-37b转染到THP-1细胞中,通过RT-qPCR和Western blot检测IL-37的表达。结果双酶切及基因测序结果显示IL-37b基因正确插入真核表达载体p EGFP-N1中;RT-qPCR和Western blot结果显示转染THP-1细胞后,IL-37表达水平明显升高(P0.01)。结论成功构建了新型抗炎因子IL-37真核表达载体p EGFP-N1/IL-37b,为进一步研究IL-37功能及与相关疾病的关系奠定基础。
【作者单位】： 石河子大学医学院;石河子大学第一附属医院检验科;辽宁医学院;中国航天员科研训练中心航天医学基础与应用国家重点实验室;
【关键词】： 白细胞介素- 基因克隆 真核表达载体 THP-细胞
【基金】：国家重点基础研究发展计划(973计划)(2014CB744404)
【分类号】：R3416
【正文快照】： 航天医学基础与应用国家重点实验室,北京100094)Corresponding author:YUAN Ming,E-mail:yuanming7711@aliyun.com;CHENG Jiang,E-mail:chengjiang1980@sina.comIL-37作为IL-1家族11个成员之一,最初是由Kumar等[1]于2000年利用计算机进行生物信息学分析时发现的,并命名为IL-1H

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