小鼠外周血单个核细胞分离、纯化

发布时间：2017-09-15 20:49

  本文关键词：小鼠外周血单个核细胞分离、纯化

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【摘要】：目的:探讨小鼠外周血单个核细胞(PBMC)最佳分离条件,提高细胞获得率与纯度,以便后续分子生物学实验。方法:小鼠摘除眼球取血,设置离心力、离心时间、实验环境温度等梯度优化,分别采用EDTA-K2、肝素、枸橼酸钠抗凝,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞,直接进行贴壁培养和分析获得率、纯度,计数存活率。结果:Ficoll密度梯度离心法经条件优化后分离的PBMC纯度可达85%,细胞获得率最高可达80%以上,活细胞百分率在92%以上。结论:Ficoll密度梯度离心法在优化条件下可有效地分离PBMC,对后续分子生物学实验无影响。
【作者单位】： 佳木斯市红十字医院;佳木斯大学;
【关键词】： 小鼠 Ficoll密度梯度离心 PBMC
【基金】：黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划,编号:1253G057 佳木斯大学自然科学基础研究类重点项目,编号:Sjz2012-11
【分类号】：R-33
【正文快照】： 外周血单个核细胞(Peripheral blood mononucle-ar cells,PBMCs)包括淋巴细胞和单核细胞。是免疫系统的重要组成,是研究免疫老化和衰老的主要依据。研究T、B淋巴细胞首要分离外周血单个核细胞,主要的分离方法是Ficoll-hypaque密度梯度离心法,因血液中各组成成分的沉降系数存在

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本文编号：858832